СПЕЦИАЛЬНЫЕ СОРБЕНТЫ ДЛЯ ВЭЖХ БИОПОЛИМЕРОВ

6. СПЕЦИАЛЬНЫЕ СОРБЕНТЫ ДЛЯ ВЭЖХ БИОПОЛИМЕРОВ

 

Научно-производственный центр ЛЕНХРОМ

НПЦ ЛЕНХРОМ является одним из основных производителей хроматографического оборудования и сорбционных технологий на рынке России и СНГ. Предприятие производит приборы, стандартные вещества и реагенты для газовой, жидкостной, тонкослойной и препаративной хроматографии.

Компанией “Ленхром” были разработаны новые типы сорбентов для ионообменной, гидрофобной, обращеннофазовой и биоафинной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) биополимеров на кремнеземных и полимерных матрицах. Поверхность сорбентов покрыта адсорбционно-инертной, защитной пленкой из ковалентносвязанных гидрофильных олигомеров, под которой простираются внутрь поры олигомерные цепи с чередующимися функциональными группами и гидрофильными спейсерами. Такая конструкция сорбентов обеспечивает отсутствие неспецифической адсорбции, полную обратимость сорбции, устранение необратимых изменений конформации белка, повышенную емкость и селективность, а также ультравысокую гидролитическую стабильность сорбентов. Разработанные сорбенты по перечисленным параметрам превосходят лучшие зарубежные аналоги. На базе указанных сорбентов разработаны готовые аналитические колонки для ВЭЖХ белков, с разделяющей способностью до 10 пиков в минуту и полупромышленные препаративные колонны с производительностью фракционирования белка до 20 г в час. [4]

7. Силикагелевые сорбенты для хроматографии

 

Силикагели "Армсорб" для хроматографии

Производственный кооператив "Акунк" предлагает силикагелевые сорбенты "Армсорб" с параметрами, приведенными в таблице. Силикагель в качестве высокоэффектной жидкостной хроматографии синтезируется из щелочно-кремнеземистого раствора по специальной технологии, обеспечивающей высокое качество продукта.

Наименование	Удельная поверхность	Суммарный объем пор	Размер фракций мкм
Армсорб Си 10-с8	200	0.55-0.60	40-100
Армсорб Си 10-с16	200	0.55-0.60	160-250
Армсорб Си 10-CN	200	0.55-0.60	200-400
Армсорб Си 10-CN2	200	0.55-0.60
Армсорб Си 30-с8	80	0.60-0.65
Армсорб Си 30-с16	80	0.60-0.65	и др.
Армсорб Си 30-CN	80	0.60-0.65
Армсорб Си 30-CN2	80	0.60-0.65

8. Предложение от ЭЛСИКО на сорбенты - силикагель

 

Сорбенты для колоночной хроматографии низкого давления

Наименование	Размер частиц	Количество фасовки
ДюраСил Н	Частицы 15-40мкм	Кол-во 0.5кг
ДюраСил Н	Частицы 15-40мкм	Кол-во 1.0кг
ДюраСил Н	Частицы 40-60мкм	Кол-во 0.5кг
ДюраСил Н	Частицы 40-60мкм	Кол-во 1.0кг
ДюраСил Н	Частицы 60-100мкм	Кол-во 1.0кг
ДюраСил Н	Частицы 60-100мкм	Кол-во 25 кг
ДюраСил Н	Частицы 100-140мкм	Кол-во 1.0кг
ДюраСил Н	Частицы 100-140мкм	Кол-во 2.5кг
ДюраСил Н	Частицы 100-140мкм	Кол-во 25 кг
ДюраСил Н С8	Частицы 40-60мкм	Кол-во 100г
ДюраСил Н С8	Частицы 40-60мкм	Кол-во 250г
ДюраСил Н С8	Частицы 40-60мкм	Кол-во 1 кг

9. СИНТЕЗ ПОЛИМЕРНЫХ СОРБЕНТОВ

 

Компания "Синтез полимерных сорбентов" предлагает серию полимерных сорбентов, специально разработанных для биохроматографических разделений. Макропористые акриловые сорбенты высокой емкости обеспечивают эффективные разделения в режимах гель-фильтрации и ионного обмена. Акриловые сорбенты СПС БИО механически прочны, долговечны, мало изменяют свой объем при изменении ионной силы элюентов.

Тип сорбента	Аналоги	Емкость ионных групп	Размер фракций
СПС БИО-гидрокси	Toyopearl HW-55		20 – 40 микрон 50 – 100 микрон 100 – 250 микрон
СПС БИО-сульфоэтил	Sephadex SP Sepharose SP	2.0 – 2.5 мэкв/г	50 - 100 микрон 100 – 250 микрон
СПС БИО-карбокси	Sephadex CM Sepharose CM	3.0 – 3..5 мэкв/г	50 - 100 микрон 100 – 250 микрон
СПС БИО-ДЕАЕ	Sephadex DEAE Sepharose DEAE	3.0 – 3.5 мэкв/г	50 - 100 микрон 100 – 250 микрон
СПС БИО-QA	Sephadex QA Sepharose QA	3.0 – 3.5 мэкв/г	50 – 100 микрон 100 – 250 микрон

 

10. Сравнение эксплуатационных свойств СПС Био-сульфоэтил и Sephadex SP при препаративных разделениях

	Sephadex SP	СПС Био-сульфоэтил
Строение матрицы сорбента	Сульфопропильные группы на сшитом декстране	Сульфоэтильные группы на сшитом полиакрилате
Емкость Начальная После 8 делений	2.0 - 2.6 мэкв/г падает на 30 %	2.0 - 2.5 мэкв/г 2.0 - 2.5 мэкв/г
Максимально допустимая скорость протока для колонки 10 х 120 см	2300 мл/час	> 7000мл/час
Максимальное изменение объема сорбента при изменении ионной силы элюента	50 %	3 %
Гидролитическая стабильность	Низкая Сорбент постепенно растворяется	Очень высокая Не отмечено признаков потери массы после 10 разделений
Микробиологическая стабильность	Низкая Во влажном виде сорбент разлагается бактериями	Высокая
Возможность щелочной санации	Невозможна	Возможна санация 0.5 М раствором щелочи

Пример очистки даларгина Tyr d-Ala Cly Phe Leu Asg от примесей: Tyr Phe Leu Asg и изомера Tyr L-Ala Cly Phe Leu Asg . Содержание даларгина в сыром продукте - 85 вес.%, в очищенном - 97.5 вес.%. Колонка 10 х 120 см Скорость потока 5000 мл/час. Проба: 450 г сырого даларгина. Ступенчатый градиент: 30 литров 0.1 М Py/Ac pH=4.5 10 литров 0.4 М Py/Ac 30 литров 0.6 М Py/Ac

11. НОВЫЕ ИОНООБМЕННЫЕ СМОЛЫ

Компания "Синтез полимерных сорбентов" предлагает российские аналоги широко известных смол Dowex. В отличие от смол Dowex ионообменные смолы СПС обладают узким гранулярным составом, что обеспечивает низкое давление в колонках и отличные кинетические свойства.

Последняя цифра в названии смолы обозначает размер влажной смолы в микронах (50, 100, 150 микрон).

Смолы СПС	аналогичные смолы Dowex
Катиониты СПС-SAC(2) -50 CПС-SAC(2) -100 весовая емкость 4.8 мэкв/г СПС-SAC(2) -150 объемная емкость 0.6мэкв/мл СПС-SAC(6)-50 СПС-SAC(6) -100 весовая емкость 4.8 мэкв/г СПС-SAC(6) -150 объемная емкость 1.4мэкв/мл СПС-SAC(8)-50 СПС-SAC(8) -100 весовая емкость 4.8 мэкв/г СПС-SAC(8) -150 объемная емкость 1.7 мэкв/мл	Катиониты Dowex 50Wx2 фракция 200-400 (75-35 микрон) Dowex 50Wx2 фракция 100-200 (150-75микрон) Dowex 50Wx2 фракция 50-100 (315-150микрон) Dowex 50Wx4 фракция 200-400 Dowex 50Wx4 фракция 100-200 Dowex 50Wx4 фракция 50-100 Dowex 50Wx8 фракция 200-400 Dowex 50Wx8 фракция 100-200 Dowex 50Wx8 фракция 50-100
Аниониты СПС-SBA(2)-50 СПС-SBA(2)-100 весовая емкость 3.7 мэкв/г СПС-SBA(2) -150 объемная емкость 0.7 мэкв/мл СПС-SBA(6)-50 СПС-SBA(6) -100 весовая емкость 4.0 мэкв/г СПС-SBA(6) -150 объемная емкость 1.1 мэкв/мл СПС-SBA(8)-50 СПС-SBA(8) -100 весовая емкость 4.0 мэкв/г СПС-SBA(8) -150 объемная емкость 1. 2 мэкв/мл	Аниониты Dowex 1x2 фракция 200-400 Dowex 1x2 фракция 100-200 Dowex 1x2 фракция 50-100 Dowex 1x4 фракция 200-400 Dowex 1x4 фракция 100-200 Dowex 1x4 фракция 50-100 Dowex 1x8 фракция 200-400 Dowex 1x8 фракция 100-200 Dowex 1x8 фракция 50-100

Компания "СПС" предлагает уникальные, высокоэффективные макропористые ионообменные смолы размером 50 микрон для разделения биомолекул (белки, нуклеотиды и д.)

Ионообменная хроматография смеси дезокситимидин-5'-моно- (1), ди-(2), три- (3), тетра-(4) и пента (4) фосфатов на колонке с сорбентом СПС-SBA(МП) - 50 (макропористый анионит размер зерна 50 микрон). Колонка 14 см3, h/D 3:1. Нагрузка 0.5 ммоль, элюент 0.05 - 0.3 М NaBr, скорость элюирования 300 мл/ч, температура 22 оС.

Макропористые смолы Катионит СПС-SAC(МП)-50 диаметр пор 1500 А, объем пор 1.0 мл/г, весовая емкость 4.9мэкв/г, объемная емкость 1.4 мэкв/мл. Анионит СПС-SBA(МП)-50 диаметр пор 1500 А, объем пор 1.0 мл/г, весовая емкость 4.0 мэкв/г объемная емкость 1.2 мэкв/мл

Аналог, но с меньшей емкостью – Source 30 S(Amersham Pharmacia) Аналог, но с меньшей емкостью - Source 30 Q(Amersham Pharmacia)

Также компания "Синтез полимерных сорбентов" предлагает акриловые гелевые и пористые ионообменные смолы различных размеров и функциональностей - сульфоэтильные, карбоксиметильные, иминодиуксусные, DEAE и др.

12. МИКРОСФЕРИЧЕСКИЕ ПОЛИМЕРНЫЕ СОРБЕНТЫ ДЛЯ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ

АНО "Синтез полимерных сорбентов" предлагает широкий спектр полистирольных и акриловых микросферических сорбентов и ионообменных смол однородного гранулометрического состава. Однородность размера гранул сорбентов и смол обеспечивают низкое давление в хроматографических колонках, превосходные механические свойства гарантируют долгую жизнь сорбентов. Размеры микросфер полимерных сорбентов варьируются от 2 до 50 микрон, ионообменных смол от 5 до 300 микрон. Принимаем заказы на разработку новых сорбентов и смол.

Очистка антрациклиновых антибиотиков методом препаративной ВЭЖХ на дивинилбензольном сорбенте Chromalite 10 MN2 (микросферы 10 микрон, размер пор 1000 А)

 

Градиентное элюирование:

А) ACN/вода 10/90 + 0.1% TFA

B) Acetonitrile + 0.1% TFA

Градиент: 10 - 90% B в течение 45 мин, UV 254 нм

 

13. ПОЛИМЕРНЫЕ СОРБЕНТЫ ДЛЯ ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ И ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Компания "Синтез полимерных сорбентов" предлагает ряд сильносшитых полистирольных сорбентов для твердофазной экстракции, адсорбции и гидрофобной хроматографии низкого давления.

Сорбент	Тип матрицы Размер фракций	Площадь поверхности м/г	Объем пор мл/г	Размер пор, A
LPS-500	Полидивинилбензол 30-40 микрон 50 – 100 микрон 75 – 150 микрон	700-800	2.0	50 – 500
LPS-1000	Полидивинилбензол 30-40 микрон 50-100 микрон 75-150 микрон	300-500	1.5	1000
LPS-2000	Полидивинилбензол 30-40 микрон 50 - 100 микрон 75 – 150 микрон	200 - 300	1.2	2000
LPS-500-H Гидрофильный сорбент Смачивается водой	Сополимер дивинилбензола/ гидрофильного мономера 30-40 микрон 50 – 100 микрон	400 - 500	1.5	50 - 1000
LPS HMN-1000	Сверхсшитый полистирол 30 микрон 50 микрон 70 микрон 100 – 200 микрон	1000 - 1300	1.0 – 1.2	Микропоры 20 – 50 А Макропоры 1000 – 1500 A

  14. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ Компания АНО "Синтез полимерных сорбентов" производит и продает полистирольные сорбенты Полисорб-1 и Полисорб-10 в количестве от 1 кг.

Свойства	Полисорб-1	Полисорб-10
Внешний вид	Белые матовые сферические гранулы	Белые матовые сферические гранулы
Тип полимерной матрицы	Сшитый полистирол	Сшитый полистирол
Массовая доля основной фракции, % не менее фракция 0.10 – 0.25 мм фракция 0.25 – 0.50 мм	95	95
Удельная поверхность, кв.м/г	250 - 350	400 - 500
Насыпной вес, г/см.куб	0.25 – 0.27	0.21 – 0.24
Влажность, %, не более	1	1

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

На данный момент существует большой выбор сорбентов, предлагаемых различными компаниями. Поэтому в наше время появилась возможность очень точно подобрать нужный для проведения исследований сорбент, руководствуясь требуемыми для проведения опыта условиями, индивидуальными характеристиками исследуемого образца, а также стоимостью предлагаемого компанией сорбента. Дальнейшее развитие науки в области хроматографических исследований приведет к созданию еще более новых и усовершенствованных типов сорбентов, что позволит добиться наиболее точного выделения и анализа веществ.

ЛИТЕРАТУРА

 

1. http://volgadeti.samara.ru/~unc/research3.htm

2. http://www.viniti.ru/

3. http://marata.narod.ru/

4. http://lenchrom.spb.ru/

5. http://akunk.narod.ru/AkunkLTD.html

6. http://www.hplc.ru/sorbent.htm

7. http://www.polymersorbents.com.ru/products.htm