Навигация
Время проведения исследований
57709
знаков
82
таблицы
0
изображений
2.2 Время проведения исследований
Май – июнь 2007 года – полевые сборы.
Август – октябрь 2007 года – лабораторные исследования.
Октябрь 2007 года – анализ и оформление работы.
2.3 Методика проведения исследований
В качестве исходного материала были использованы изолированные зародыши. Использовать в качестве первичных эксплантов побеги или листья-неудобно. Методика исследований базировалась на общепринятых классических приемах с культурами изолированных тканей и органов растений Зародыши высаживали на безгормональную питательную среду с минеральной основой по прописи Мурасиге-Скуга , на которой образовывались проростки. Далее их делили на фрагменты и пересаживали на модифицированные питательные среды для получения пролиферирующей культуры.
В условиях in vitro растения культивировали в чашках Петри и биологических пробирках при освещении с интенсивностью 3-5 клк, при 16-часовом фотопериоде, температуре 24 С и относительной влажности воздуха 70%.
Статистическая обработка данных проводилась по методике Б.А. Доспехова .
2.4 Оборудование
· Аналитические весы
· Пробирки
· Скальпели
· Пинцеты
· Линейка
· Песочные часы
· Чашки Петри
· Спиртовка
· Автоклав
· Штатив
· Фильтровальная бумага
2.5 Личный вклад
Автор работы принял личное участие в сборе полевого материала и лабораторных исследованиях под руководством научного сотрудника ГУ « Волгоградский региональный ботанический сад» Ю.Б. Утц и благодарит за предоставленную возможность проведения исследований директора ГУ «Волгоградский региональный ботанический сад» О.И. Короткова.
2.6 Результаты исследований и обсуждение
В качестве первичного материала для введения в культуру in vitro нами были использованы изолированные зародыши.Предварительно обрабатывали их 95%-ным этиловым спиртом в течение 50-60 секунд. В качестве стерилизатора использовали 3%-ый «Лизоформин» (действующие вещества: глутаровый альдегид, глиоксаль и дидецилдиметиламмоний хлорид). «Лизоформин» применяется для дезинфекции медицинских изделий и обладает не только бактерицидными, фунгицидными и спороцидными, но и вирулицидными свойствами, что является важным моментом для получения стерильных эксплантов.
О О
С–СН2–СН2–СН2–С
|
|
Глутаровый альдегид
С–С Сl-
Н Н С10Н4 + СН3
|
Глиоксаль N 
С10Н4 СН3
дидецилдиметиламмоний хлорид
Схема 1. Молекулярная структура действующих веществ Лизоформина.
Оптимальное время стерилизации 7-10 мин. Поверхностно простерилизованные и промытые семена высаживали в чашки Петри на агаризованную питательную среду Мурасиге – Скуга без добавления фитогормонов. Основная часть семян прорастала на 7 – 10-е сутки, остальные на 13 – 15 сутки с момента помещения их на питательную среду. Полученные проростки в асептических условиях расчленяли на фрагменты и переносили для роста и размножения на питательную среду Мурасиге – Скуга с добавлением 0.5 мг/л 6-БАП.
Для оптимизации состава среды на этапе микроразмножения к питательной среде, содержащей минеральные соли по Мурасиге и Скугу, добавляли в различных концентрациях 6-БАП (0.1; 0.5; 1.0 мг/л), зеатин (0.1; 0.5; 1.0 мг/л), кинетин (1.0; 2.0; 5.0 мг/л) и для вытягивания побегов гибберелловую кислоту (0.2 и 0.4 мг/л). При этом снимались следующие показатели:
1. Коэффициент размножения – количество растений, развившихся из одного экспланта;
2. Количество аномальных (витрифицированных) растений;
3. Количество листьев;
4. Высота растения.
Таблица №1. Влияние гормона зеатина на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.
1-ая повторность
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | h2-h1 | Кол-во листьев2-кол-во листьев1 | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф. размноже ния | ||||
| 3.2 | 1 | 3,7 | 2 | 1 | 0,5 | 1 | ||
| 0,5 | 3 | 2 | 3,3 | 3 | 1 | 0,3 | 1 | |
| 1,5 | 1 | 1,9 | 1 | 1 | 0,4 | 0 | ||
| 3,5 | 1 | 4,2 | 4 | 1 | 0,7 | 3 | ||
| 1,8 | 2 | 2,8 | 4 | 3 | 1 | 2 | ||
| зеатин | Среднее значение | 2,6 ± 0,4 | 1,4 ± 0,2 | 3,2 ± 0,4 | 2,8 ± 0,6 | 1,4 ± 0,4 | 0,6 ± 0,3 | 1,4±0,5 |
| 1,2 | 1 | 1,5 | 1 | 1 | 0,3 | 0 | ||
| 3 | 1 | 3,2 | 5 | 1 | 0,2 | 4 | ||
| 1 | 0,5 | 1 | 0,9 | 1 | 1 | 0,4 | 0 | |
| 3,8 | 1 | 4,7 | 4 | 1 | 0,9 | 3 | ||
| 4,5 | 1 | 5,4 | 7 | 1 | 0,9 | 6 | ||
| Среднее значение | 2,6 ±0,8 | 1 | 3,14±0,9 | 3,6 ±1,2 | 1 | 0,54 ±0,2 | 2,6±1,2 | |
| 1,2 | 1 | 1,6 | 1 | 1 | 0,4 | 0 | ||
| 1,7 | 1 | 1,9 | 1 | 1 | 0,2 | 0 | ||
| 0,1 | 3,2 | 3 | 4 | 5 | 1 | 0,8 | 2 | |
| 2 | 1 | 2,4 | 3 | 1 | 0,4 | 2 | ||
| 4 | 1 | 4,1 | 1 | 1 | 0,1 | 0 | ||
| Среднее значение | 2,4 ±0,5 | 1,4 ±0,4 | 2,8 ±0,5 | 2,2 ±0,8 | 1 | 0,4 ±0,1 | 1 ±0,3 | |
2-ая повторность
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | h2-h1 | Кол-во листьев2-кол-во листьев1 | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф. размноже ния | ||||
| 3.2 | 1 | 3,6 | 3 | 1 | 0,4 | 2 | ||
| 0,5 | 1 | 2 | 3,2 | 2 | 1 | 2,2 | 0 | |
| 3,5 | 1 | 3,7 | 1 | 1 | 0,2 | 0 | ||
| 3,4 | 2 | 4,3 | 3 | 2 | 0,9 | 1 | ||
| 1,8 | 2 | 2,6 | 4 | 2 | 0,8 | 2 | ||
| зеатин | Среднее значение | 2,6 ±0,5 | 1,6 ±0,2 | 3,4 ±0,3 | 2,6 ± 0,5 | 1,4 ± 0,2 | 0,9 ± 0,4 | 1,0 ±0,4 |
| 1,3 | 1 | 1,5 | 2 | 1 | 0,2 | 0 | ||
| 2,9 | 1 | 3,3 | 5 | 1 | 0,4 | 4 | ||
| 1 | 0,7 | 1 | 1,2 | 2 | 1 | 0,5 | 1 | |
| 3,5 | 2 | 4,7 | 4 | 1 | 1,2 | 2 | ||
| 4,5 | 3 | 5,5 | 7 | 1 | 1 | 4 | ||
| Среднее значение | 2,6 ±0,7 | 1,6 ±0,4 | 3,24±0,8 | 4 ±0,9 | 1 | 0,6 ±0,2 | 2,2±,8 | |
| 1,3 | 1 | 1,6 | 2 | 1 | 0,3 | 1 | ||
| 1,8 | 1 | 2,2 | 1 | 1 | 0,4 | 0 | ||
| 0,1 | 3,1 | 3 | 4 | 5 | 1 | 0,9 | 2 | |
| 2,4 | 2 | 2,9 | 2 | 1 | 0,5 | 0 | ||
| 3,5 | 1 | 4 | 1 | 1 | 0,5 | 0 | ||
| Среднее значение | 2,4 ±0,5 | 1,6 ±0,4 | 2,9 ±0,4 | 2,2 ±0,7 | 1 | 0,5 ±0,1 | 0,6 ±0,4 | |
Таблица №2 Влияние гормона кинетина на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.
1-ая повторность.
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | h2-h1 | Кол-во листьев2-кол-во листьев1 | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф. размноже ния | ||||
| 1,3 | 4 | 5,6 | 4 | 1 | 4,3 | 0 | ||
| 0,8 | 3 | 3 | 3 | 1 | 2,2 | 0 | ||
| 1 | 1,6 | 3 | 2,4 | 4 | 1 | 0,8 | 1 | |
| 1,4 | 4 | 3,9 | 5 | 4 | 2,5 | 1 | ||
| 2,4 | 2 | 4,3 | 4 | 1 | 1,9 | 2 | ||
| Кинетин | Среднее значение | 1,5 ±0,3 | 3,2 ±0,4 | 3,84 ±0,5 | 4 ±0,6 | 1,6 ±0,6 | 2,34 ±0,6 | 0,8 ±0,4 |
| 2 | 4 | 10,4 | 5 | 2 | 8,4 | 1 | ||
| 2,3 | 4 | 7 | 5 | 2 | 4,7 | 1 | ||
| 2 | 2,5 | 6 | 3,6 | 6 | 2 | 1,1 | 0 | |
| 2,2 | 8 | 5,5 | 9 | 3 | 3,3 | 1 | ||
| 1,8 | 2 | 4 | 4 | 3 | 2,2 | 2 | ||
| Среднее значение | 2,16 ±0,1 | 4,8 ±1 | 6,1 ±1,2 | 5,8 ±0,8 | 2,4 ±0,2 | 3,94 ±1,2 | 1,2 ±0,09 | |
| 2,2 | 6 | 3,9 | 7 | 1 | 1,7 | 1 | ||
| 0,8 | 2 | 4 | 4 | 1 | 3,2 | 2 | ||
| 5 | 2,8 | 5 | 6,3 | 5 | 1 | 3,5 | 0 | |
| 1 | 2 | 3 | 3 | 1 | 2 | 1 | ||
| 1 | 4 | 2,2 | 6 | 5 | 1,2 | 2 | ||
| Среднее значение | 1,56 ±0,4 | 3,8 ±0,8 | 3,9 ±0,6 | 5 ±0,7 | 1,8 ±0,8 | 2,32 ±0,4 | 1,2 ±0,8 | |
2-ая повторность
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | h2-h1 | Кол-во листьев2-кол-во листьев1 | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф. размноже ния | ||||
| 2,5 | 2 | 4,5 | 4 | 2 | 2 | 2 | ||
| 1,5 | 5 | 3,6 | 6 | 1 | 2,1 | 1 | ||
| 1 | 1,6 | 2 | 2,5 | 3 | 2 | 0,9 | 1 | |
| 0,9 | 4 | 3 | 5 | 1 | 2,1 | 1 | ||
| 1,5 | 4 | 5,7 | 4 | 2 | 4,2 | 0 | ||
| Кинетин | Среднее значение | 1,6 ±0,2 | 3,4 ±0,6 | 3,9 ±0,6 | 4,4 ±0,5 | 1,6 ±0,2 | 2,3 ±0,5 | 1±0,3 |
| 1,7 | 6 | 3,9 | 7 | 3 | 2,2 | 1 | ||
| 2,1 | 4 | 5,5 | 5 | 2 | 3,4 | 1 | ||
| 2 | 2,4 | 8 | 3,6 | 9 | 3 | 1,2 | 1 | |
| 2,2 | 2 | 7 | 2 | 3 | 4,8 | 0 | ||
| 1,9 | 4 | 10 | 5 | 2 | 8,1 | 1 | ||
| Среднее значение | 2,06 ±0,1 | 4,8 ±1 | 6 ±1,2 | 5,6 ±1,2 | 2,6 ±0,2 | 3,94 ±1,2 | 0,8 ±0,2 | |
| 2,7 | 4 | 6,1 | 6 | 1 | 3,4 | 2 | ||
| 0,5 | 1 | 1,2 | 1 | 2 | 0,7 | 0 | ||
| 5 | 0,8 | 5 | 3,6 | 5 | 3 | 2,8 | 0 | |
| 2,1 | 2 | 3,7 | 4 | 2 | 1,6 | 2 | ||
| 1,1 | 6 | 4 | 7 | 1 | 2,9 | 1 | ||
| Среднее значение | 1,4 ±0,4 | 3,6 ±0,9 | 3,7 ±0,8 | 4,6 ±1 | 1,8 ±0,3 | 2,3 ±1,6 | 1 ±0,4 | |
Таблица №3 Влияние гибберелловой кислоты на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.
1-ая повторность.
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | h2-h1 | Кол-во листьев2-кол-во листьев1 | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф.размноже ния | ||||
| 1,6 | 4 | 3,1 | 5 | 1 | 1,5 | 1 | ||
| 2,4 | 4 | 3,9 | 4 | 1 | 1,5 | 0 | ||
| 0,4 | 2,6 | 2 | 3 | 3 | 1 | 0,4 | 1 | |
| 2,6 | 4 | 3,2 | 4 | 1 | 0,6 | 0 | ||
| 2,5 | 5 | 3,6 | 6 | 1 | 1,1 | 1 | ||
| ГБК | Среднее значение | 2,34±0,2 | 3,8 ±0,5 | 3,4 ±0,2 | 4,4 ±0,5 | 1 | 1,02 ±0,2 | 0,6 ±0,2 |
| 2,7 | 3 | 4,5 | 4 | 1 | 1,8 | 1 | ||
| 1,2 | 3 | 6,8 | 6 | 1 | 5,6 | 3 | ||
| 0,2 | 2 | 6 | 4 | 3 | 1 | 2 | 0 | |
| 1,5 | 5 | 1,7 | 2 | 1 | 0,2 | 0 | ||
| 1 | 2 | 1,3 | 3 | 1 | 0,3 | 1 | ||
| Среднее значение | 1,7 ±0,3 | 3,8 ±0,5 | 3,6 ±1 | 4,8 ±0,6 | 1 | 1,8 ±1 | 1 ±0,5 | |
2-ая повторность
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | h2-h1 | Кол-во листьев2-кол-во листьев1 | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф.размноже ния | ||||
| 1,5 | 3 | 3,1 | 3 | 1 | 1,6 | 0 | ||
| 2,4 | 4 | 4 | 4 | 1 | 1,6 | 0 | ||
| 0,4 | 2,5 | 3 | 3,1 | 4 | 1 | 0,6 | 1 | |
| 2,6 | 4 | 4 | 5 | 1 | 0,4 | 1 | ||
| 2,5 | 4 | 3,7 | 4 | 1 | 1,2 | 0 | ||
| ГБК | Среднее значение | 2,3 ±0,2 | 3,6 ±0,2 | 3,6 ±0,2 | 4 ±0,3 | 1 | 1 ±0,3 | 0,4 ±0,2 |
| 2,8 | 2 | 4,7 | 3 | 1 | 1,9 | 1 | ||
| 1,3 | 3 | 6,7 | 3 | 1 | 5,4 | 0 | ||
| 0,2 | 1,9 | 5 | 4,2 | 5 | 1 | 2,3 | 0 | |
| 1,6 | 3 | 1,8 | 4 | 1 | 0,2 | 1 | ||
| 1,1 | 6 | 1,5 | 8 | 2 | 0,4 | 2 | ||
| Среднее значение | 1,7 ±0,3 | 3,8 ±0,7 | 3,8 ±0,9 | 4,6 ±0,9 | 1,2 ±0,2 | 2 ±0,8 | 0,8 ±0,4 | |
Таблица № 4Влияние гормона 6-бензиламинопурин на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского.
1-ая повторность.
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | |||
| h1 | Кол-во листьев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф. размноже ния | ||
| 3 | ||||||
| 4 | ||||||
| 1 | 3 | |||||
| 5 | ||||||
| 1 | ||||||
| 6-БАП | Среднее значение | 3,8 ±0,5 | ||||
| 2 | ||||||
| 7 | ||||||
| 0,1 | 3 | |||||
| 1 | ||||||
| 1 | ||||||
| Среднее значение | 4 ±1 | |||||
| 3 | ||||||
| 2 | ||||||
| 0,5 | 2 | |||||
| 3 | ||||||
| 1 | ||||||
| Среднее значение | 2,5 ±0,3 | |||||
2-ая повторность
| гормон | Концентрация, мг/л | В начале пассажа | В конце пассажа | |||
| h1 | Кол-во листь ев1 | h2 | Кол-во листьев2 | Коэф. размноже ния | ||
| 1 | ||||||
| 4 | ||||||
| 1 | 5 | |||||
| 3 | ||||||
| 3 | ||||||
| 6-БАП | Среднее значение | 3,8 ±0,5 | ||||
| 1 | ||||||
| 2 | ||||||
| 0,1 | 6 | |||||
| 4 | ||||||
| 2 | ||||||
| Среднее значение | 3 ±0,9 | |||||
| 1 | ||||||
| 3 | ||||||
| 0,5 | 2 | |||||
| 4 | ||||||
| 2 | ||||||
| Среднее значение | 2,4 ±0,5 | |||||
Таблица № 5 Влияние различных цитокининов на коэффициент размножения Майкарагана волжского.
| Регулятор роста | Концентрация, мг/л | Коэффициент размножения | |
| 1-ая повторность | 2-ая повторность | ||
| Кинетин | 1,0 | 1,6±0,6 | 1,6±0,2 |
| 2,0 | 2,4±0,2 | 2,6±0,2 | |
| 5,0 | 1,8±0,8 | 1,8±0,3 | |
| Зеатин | 0,1 | 1 | 1 |
| 0,5 | 1,4±0,4 | 1,4±0,2 | |
| 1,0 | 1 | 1 | |
| 6-БАП | 0,1 | 3,8±0,5 | 3,8±0,5 |
| 0,5 | 4±1 | 3±0,9 | |
| 1,0 | 2,5±0,3 | 2,4±0,5 | |
Таблица № 6 Влияние цитокининов и гибберелловой кислоты на регенерацию и рост побегов Майкарагана волжского в культуре in vitro.
| Регулятор роста | Концентрация, мг/л | Коэффициент размножения | Кол-во листьев, шт. | Линейный рост, см | |||
| 1-ая повтор- ность | 2-ая повтор- ность | 1-ая повтор-ность | 2-ая повтор-ность | 1-ая повтор-ность | 2-ая повтор-ность | ||
| 0,1 | 1 | 1 | 0,8±0,4 | 0,6±0,4 | 0,4±0,1 | 0,5±0,1 | |
| Зеатин | 0,5 | 1,4±0,4 | 1,4±0,2 | 1,4±0,5 | 1±0,4 | 0,6±0,3 | 0,9±0,4 |
| 1 | 1 | 1 | 2,6±1,2 | 2,2±0,8 | 0,54±0,2 | 0,6±0,2 | |
| 1 | 1,6±0,6 | 1,6±0,2 | 0,8±0,4 | 1±0,3 | 2,34±0,6 | 2,3±0,5 | |
| Кинетин | 2 | 2,4±0,2 | 2,6±0,2 | 1,2±,09 | 0,8±0,2 | 3,94±1,2 | 3,94±1,2 |
| 5 | 1,8±0,8 | 1,8±0,3 | 1,2±0,8 | 1±0,4 | 2,32±0,4 | 2,3±1,6 | |
| ГБК | 0,2 | 1 | 1 | 1±0,5 | 0,8±0,4 | 1,8±1 | 2±0,8 |
| 0,4 | 1 | 1,2±0,2 | 0,6±0,2 | 0,4±0,2 | 1,02±0,2 | 1±0,3 | |
В качестве вторичных эксплантов брались фрагменты побега длиной 7-10 мм. Оптимальным временем пассажа для Майкарагана волжского является 30-35 дней. В дальнейшем увеличения коэффициента размножения не происходило, и замедлялись темпы роста. Кроме того, у значительной части растений in vitro начинали подсыхать листья.
Из всех цитокининов наибольший коэффициент размножения наблюдался при использовании в качестве гормона 6-БАП. (табл. №5). Однако при этом происходили изменения в морфологии побегов: междоузлия побегов сократились, уменьшились размеры листьев, изменилась их форма. Кроме того, у половины побегов при концентрации 1.0 мг/л 6-БАП наблюдалась витрификация побегов (остекленение). При пересаживании растений-регенерантов на среды с меньшей концентрацией не все растения принимали нормальную морфологию.
Кинетин оказывал стимулирующее действие на регенерационные процессы в широком диапазоне концентраций (от 1.0 до 5.0 мг/л). Под его действием коэффициент размножения составил от 1,6 до 2,4. Растения-регенеранты были нормальной морфологии и за пассаж выросли на 1,9 – 2,3 см (табл. №6).
Полученные результаты продемонстрировали нецелесообразность использования в качестве цитокининов зеатина, так как индуцировать регенерацию побегов удалось не у всех эксплантов, стебли растений были очень тонкие, намного уменьшались размеры листьев.
Нецелесообразным оказалось использование гибберелловой кислоты на этапе вытягивания побегов перед укоренением. Линейный рост при концентрации 0,2 мг/л составил 0,3 см, а при 0,4 мг/л – 1,1 см (табл. №6) в то время как при использование кинетина линейный рост составил от 1,9 до 2,3 см. При выращивании побегов на среде с кинетином не требуется помещать их на среду с другим составом для вытягивания побегов, так как они и так уже с вытянутыми междоузлиями. Таким образом, нам удалось сократить процесс микроклонального размножения на один этап.
Общее количество растений-регенерантов можно повысить, если применить в сочетании два метода: культуру пазушных почек и выращивание растений из первичного каллуса. В качестве доноров экспланта при получении каллуса использовали корни, гипокотиль и семядольные листья. Изучали два варианта питательных сред, в составе которых присутствовали регуляторы роста 2,4-Д, ИУК и 6-БАП, а также ЩУК и повышенные концентрации сахарозы. Каллус индуцировали в условиях темноты. Наличие ауксина и цитокинина явилось обязательным условием для получения активно растущей каллусной культуры, так как на среде без экзогенных регуляторов роста процессы пролиферации не происходили. Частота индукции (возникновения) каллуса на всех изучаемых средах составила 100 %. Однако темпы пролиферации каллуса различались и зависели как от состава среды так и от экспланта. Так на семядольных листьях каллус вообще не возникал, на корнях наблюдалось возникновение небольших очагов. На гипокотиле образовывался хорошо растущий, морфогенный каллус. Побеги полученные в каллусной культуре переносили на питательную среду другого состава и на свет.
Выводы
1. Оптимальным стерилизующим средством на этапе введения в культуру следует считать «Лизоформин» в концентрации 3 %.При его использовании наблюдалась 100 % стерилизация семян.
2. Экспериментально доказано, что из всех использованных цитокининов лучшим индуктором побегообразования является кинетин. Он оказал стимулирующее действие на регенерационные процессы в широком диапазоне концентраций (от 1 мг/л до 5 мг/л).
3. Использование кинетина позволило сократить процесс клонального микроразмножения на один этап, так как не требовалось помещать растения перед укоренением на среду для вытягивания.
4. Наибольший коэффициент размножения наблюдался при использовании 6-БАП при концентрации 0,1 мг/л.
5. Эффективным оказалось сочетание метода культуры пазушных почек и выращивание растений из первичного каллуса. В этом случае регенеранты, полученные первым методом, выступают в качестве растений- доноров эксплантов, используемых для получения каллуса.
Таким образом, результаты проведенных исследований показывают реальную возможность использования методов биотехнологии для введения в культуру и сохранения вида. Считаем необходимым продолжить исследования по данной тематике.
Список литературы
1. Борисова А. Г. Род Calophaca Fisch. – Майкараган // Флора Юго-Востока европейской части СССР. Вып. 5. М.; Л.: Гос. изд-во с.-х. и колх. - коопер. лит-ры, 1931. С. 585.
2. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе. Учебное пособие. М.: ФБК-Пресс, 1999. 160 с.
3. Васильева Л. И. Род Майкараган – Calophaca Fisch. Ex DC. // Флора европейской части СССР. Т. 6. Л.: Наука, 1987. С. 45-47.
4. Вечернина Н.А. Методы биотехнологии в селекции, размножении и сохра нении генофонда растений.: монография/Барнаул: Издательство Алтайского университета,2004.с.93-131.
5. Володин В.,Филиппова В. Микроклональное размножение как способ сохранения редких и исчезающих видов растений//Бюллетень Главного Ботанического сада. М.: Наука,2004. с.125-127.
6. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. - М.: Колос, 1979. 416с.
7. Красная книга Волгоградской области. Т.2. Волгоград: Волгоград, 2006. 236с.
8. Камелин Р.В. Биотехнологическое разнообразие и интродукция растений
//Растительные ресурсы, 1997, Т.33. Вып. 3. С.1 – 11.
9. Камелин Р. В. Майкараган волжский - Calophaca wolgarica (L. fil.) Fisch. ex DC. // Красная книга РСФСР (растения). М.: Росагропромиздат, 1988. С. 184-185.
10. Лабораторно-практические занятия по сельскохозяйственной биотехнологии.
Методические указания. М.: Издательство МСХА, 1996. 90 с.
11. Молканова О.И. Сохранение генофонда ценных растений с помощью культуры
тканей// Тезисы докл. VIII междунар. конф. – Саратов, 2003. – С.261.
12. Сагалаев В. А. К флоре степей правобережной части Волгоградской области // Бюл. Моск. об-ва исп. прир. Отд. биол. 1988. Ц93. вып. 3. С. 104-113.
13. 
Сагалаев В. А., Сурагина С. А., Игнатов С. М., Веденеев А. М., Баштаник Д. Ф. Перечень объектов растительного мира, рекомендуемых для занесения в Красную книгу Волгоградской области // Доклад о состоянии окружающей среды Волгоградской области в 2003 году. Волгоград, 2004г. С. 236-248.
14. Сагалаев В. А., Веденеев А. М., Сурагина С. А., Игнатов С. М., Баштаник Д. Ф. Аннотированный список редких и нуждающихся в охране видов растений и грибов Волгоградской области (материалы для Красной книги Волгоградской области) // Государственный доклад «О состоянии окружающей среды Волгоградской области в 2003 году». Волгоград, 2004г. С. 247-267.
15. Сельскохозяйственная биотехнология / В.С. Шевелуха, С.В. Дегтярев, Г.М. Артамонова и др. М.: изд-во МСХА, 1995, 310 с.
16. Связева О. A. Calophaca wolgarica (L. fil.) DC. - Майкараган волжский // Ареалы деревьев и кустарников СССР. Т. 3. Л.: Наука, 1986. С. 26 [карта 11Д].
17. Шипчинский Н. В. Род Майкараган – Calophaca Fisch. // Деревья и кустарники СССР. Т.4. Москва – Ленинград, издательство Академии наук СССР, 1958. С. 197-198.
18. 
Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures// Phsiol. Plant.1962.Vol. 15, N 3. P. 473-497.
ПОПУЛЯЦИОННЫЕ ДАННЫЕ.
17. 05. 07.
Закладка транссект.
Цель: определить состояние популяции Ириса Низкого
Методом закладки транссект для регионального кадастра редких видов растений.
Лимитирующий фактор: опушка леса, грунтовая дорога, пахота.
Координата:
N 48 40 949
E 043 27 388 Высота 519
Исследуемый вид: Ирис Низкий.
Географическое положение: Волгоградская область, Калачевский район
Правый берег реки Дон, склон балки.
Микрорельеф: надпойменная терраса.
Мезорельеф: склон балки.
Тип почв: лугово-каштановые.
Структура: плотная.
Механический состав: глинистый.
Мощность подстилки: степной войлок 0,5 см. Мощность гумусового горизонта, 40 см.
Условие увлажнения и уровень грунтовых вод: увлажненная, 100-150 м.
Исследуемый вид: Ирис низкий.
Площадь популяции изучаемого вида: 800м².
Длина территории популяции по наиболее длинной оси, 40м
Ширина территории популяции по наиболее длинной оси, 20 м.
2-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 65%-5б | Колошение |
| 2.Мышиный горошек | 15%-2б | Бутонизация Вегетация |
| 3.Мятлик живородящий | 8%-2б | Колошение |
| 4.Молочай прутьевидный | 4%-1б | Вегетация |
4-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 50%-4б | Колошение |
| 2.Мышиный горошек | 15%-2б | Бутонизация Вегетация |
| 3. Лапчатка Серебристая | 15%-2б | Бутонизация Вегетация |
6-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 59%-5б | Колошение |
| 2.Мятлик живородящий | 20%-3б | Колошение |
| 3.Ястребинка волосистая | 10%-2б | Вегетация |
| 4.Лапчатка серебристая | 5%-1б. | Вегетация |
8-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 64%-5б | Колошение |
| 2.Мышиный горошек | 12%-2б | Бутонизация Вегетация |
| 3.Мятлик живородящий | 4%-1б | Колошение |
| 4.Молочай прутьевидный | 2%-1б | Вегетация |
10-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 40%-5б | Колошение |
| 2.Мышиный горошек | 12%-2б | Бутонизация Вегетация |
| 3.Мятлик живородящий | 10%-2б | Колошение |
Спектр возрастных состояний изучаемого вида ( путем прямого подсчета)
| %п /п | Проростки, p | Ювенильные, j | Имматурные im | Виргинильные, v | Генеративные, g | Сенильные, s | Всего |
| 1. | 6 | 30 | 6 | 5 | - | - | 47 |
| 2. | 6 | 31 | 7 | 6 | - | 1 | 50 |
| 3. | 10 | 8 | 15 | 3 | 10 | - | 46 |
| 4. | 6 | 18 | 27 | 4 | 13 | - | 68 |
| 5. | 4 | 24 | 34 | 3 | 13 | 1 | 79 |
| 6. | 2 | 10 | 10 | 2 | 9 | 1 | 34 |
| 7. | 2 | 8 | 4 | 1 | 10 | - | 25 |
| 8. | 9 | 17 | 28 | 6 | 36 | 1 | 97 |
| 9. | 4 | 9 | 6 | 2 | - | - | 21 |
| 10. | 7 | 7 | 3 | 1 | 1 | - | 19 |
Морфометрические измерения.
| №п/п | Высота | Кол-во листьев | Диаметр | Длина листа | Ширина листа | Высота цветоноса | Диаметр цветка | Кол-во цветков на раст. | Высота цветка |
| 1.1р | 26 | 12 | 7 | 27 19 15 18 5 | 1,3 1 0,9 1 0,5 | 20 | 4 4,5 3,8 | 3 | 2 2,3 1,9 |
| 2р | 21 | 14 | 7,5 | 6 17 16 18 17,5 | 0,5 0,7 1 0,9 1 | 17 | 4,1 3,9 | 2 | 2,2 2,2 |
| 2. 1р | 21 | 16 | 6 | 21 16 16,5 11 13 | 1 1 1,5 1 1 | 16 | 4,3 4,2 | 2 | 2,1 2,2 |
| .2р | 20,5 | 15 | 5 | 15,5 16 14 12 12 | 0,9 0,8 0,5 0,9 0,6 | 19 | 3,9 | 1 | 2,4 |
| 3.1р | 18 | 13 | 6,5 | 16 15 12 11,5 12,5 | 0,9 1 0,8 0,6 0,7 | 12,5 | 3,7 3,9 4,1 | 3 | 2,5 2,4 2,2 |
| 2р | 15 | 13 | 7 | 15,5 16 12 14 11 | 1 0,9 0,8 0,6 1 | 15 | 3,8 4,2 | 2 | 2 2,1 |
| 4.1р | 19 | 10 | 4,5 | 13 18 19 8 17 | 1 1,5 1,8 1,5 1,8 | 11 | 3,8 4,4 4,3 | 3 | 2,5 1,9 3 |
| 2р | 19,5 | 9 | 4,6 | 16 13 17 7 8 | 1,1 1,1 1,1 0,5 0,6 | 10,7 | 4 4,1 | 2 | 2,2 1,2 |
| 5.1р | 13 | 14 | 4,5 | 14,2 13 12,8 13,1 10,5 | 0,8 1 1 1,1 0,9 | 13,5 | 4,1 4 3,9 3,8 | 4 | 2,3 2,9 2,7 1,9 |
| 2р | 15,2 | 16 | 4,7 | 15,3 15,2 13,2 11,2 8,1 | 0,7 1 1 1 0,9 | 11,2 | 3,7 | 1 | 2,5 |
| 6.1р | 16,1 | 18 | 9,8 | 13,3 15,4 10,5 9,4 9,2 | 1 1,1 0,8 0,6 1,3 | 12 | 4 4,1 3,7 | 3 | 2 1,9 2,3 |
| 2р | 13,7 | 18 | 5,5 | 10,5 12,5 12 12,5 13 | 0,7 0,9 10,7 0,9 | 14 | 3,8 4 5,1 3 | 4 | 2,1 1,9 2 2,7 |
| 7.1р | 15 | 17 | 5 | 13,5 15 11,7 10 15 | 1,5 1 1,5 0,6 0,5 | 12 | 3,7 | 1 | 2,1 |
| 2р | 13,1 | 15 | 4 | 12,5 13 10,5 9 11 | 0,9 0,7 0,8 1,1 1 | 8 | 4,2 3,9 3,7 | 3 | 2,8 2,5 2,3 |
| 8.1р | 19 | 15 | 5,7 | 19,5 13,2 15 14 10 | 1,5 1,6 0,5 1 0,7 | 12,5 | 4,5 4 3,9 | 3 | 1,5 1,8 2,5 |
| 2р | 16 | 13 | 6 | 14,5 11 10 9 15,5 | 1,2 1,4 1 1,9 1,1 | 12 | 4,5 3,2 | 2 | 2 2,3 |
| 9.1р | 15,6 | 16 | 6,2 | 15 11 8 7 12 | 1,3 1,3 1,3 1 0,9 | 11 | 3,5 | 1 | 2,9 |
| 2р | 13,4 | 17 | 8,1 | 11 6,5 9 8,5 11,2 | 0,8 1 0,9 0,8 0,9 | 10 | 2,8 3,4 | 2 | 1,5 1,9 |
| 10. 1р | 19,6 | 16 | 5,4 | 18,5 15 14,4 14 9,5 | 1,7 1,5 1,3 1,51 | 14 | 3 2 2,3 | 3 | 1,7 1,5 2 |
| 2р | 18,7 | 15 | 2,3 | 18,5 18,4 12 16 15 | 1 1,21,11,1 1,3 | 16 | 2,9 | 1 | 3,5 |
Семенная продуктивность.
2-я площадка
1-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | |||||||||||
|
|
| 4,5 | 1,6 | 12 | 26 | 1 |
2-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||
|
|
| 6 | 1,8 | 38 | 14 | 0 | ||||||||||||||||
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | 1 | 1 | - | - | 1 | - | - |
4-я площадка
Семенная продуктивность 1-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||||
|
|
| 4,5 | 1,7 | 31 | 14 | 0 | ||||||||||||||||||
2-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||
|
|
| 4,3 | 1,6 | 31 | 24 | 0 | ||||||||||||||||
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | 1 | 1 | - | - | 1 | - | - |
6-я площадка
Семенная продуктивность 1-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||||
|
|
| 4,3 | 1,4 | 18 | 35 | 0 | ||||||||||||||||||
2-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||
|
|
| 4,1 | 1,7 | 14 | 34 | 0 | ||||||||||||||||
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | 1 | 1 | - | - | 1 | - | - |
8-я площадка
Семенная продуктивность 1-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||||
|
|
| 5,5 | 1,7 | 20 | 36 | 0 | ||||||||||||||||||
2-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||
|
|
| 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | ||||||||||||||||
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | 1 | 1 | - | - | 1 | - | - |
10-я площадка
Семенная продуктивность 1- е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||||
|
|
| 5,2 | 2,1 | 36 | 32 | 0 | ||||||||||||||||||
2-е растение
| Кол-во полноценных плодов | Кол-во недоразвитых плодов | % плода | Длина плода, см | Ширина плода, см | Число полноценных семян в плоде, шт | Число неполноценных семян в плоде, шт | Число поврежденных Вредителями в плоде, шт | ||||||||||||||||
|
|
| 5 | 1,9 | 32 | 21 | 0 | ||||||||||||||||
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | 1 | 1 | - | - | 1 | - | - |
Описание почвенного разреза.
15.05
2м /80см
Географическая привязка: балка Красная, верхняя часть склона, к югу от моста через реку.
Рельеф:
Мезорельеф: склон балки.
Микрорельеф: равнинный участок, верхняя часть балки, правый берег реки Дон.
Ассоциация: груднично-ястребинно-типчаковая.
Окружение: С юга грунтовая дорога, на севере мост через реку Дон,
На востоке балка, на западе поросль дуба черешчатого.
Глубина разреза 155см.
Хар-ка слоев
А- степной войлок 0- 0,5см
А¹-гумусово-акумулятивный, уплотненный, пылеватая, суглинок, новообразований не обнаружено, включения: корни растений, хар-ка перехода: плавная.
А²-горизонт вымывания, структура плотная, пылеватая, суглинок, новообразования: каолин, включения: корни растений, переход постепенный.
В-вмывание, в верхней части плотная, в нижней уплотненная, зернистая, мех. состав:
глинистый, новообразования: каолин, оксид железа, включения: корни растений, переход плавный.
ВС-промежуточный между материнской породой,структура плотная, пылеватая, мех. состав: глинистый, новообразования: каолин, включения: корни растений.
С- материнская порода.
Мощность слоев:
А¹-0,5-29,5
А²-29,6-59,5
В-59,6-112,5
ВС-112,6 и глубже.
Окраска:
А- степной войлок
А¹-коричнево-серая
А²-темно-коричневая
В-коричневая с темными оттенками
ВС-желтая.
Влажность:
А¹-свежая
А²-увлажненная
С-увлажненная
ВС-увлажненная
| А |
| А¹ |
|
А² |
| В |
| ВС |
| С |
06.07.07
Определение состояния ценопопуляции Ириса Низкого(Iris pumila)
Путем закладки транссект.
Исследуемый вид: Ирис Низкий.
Географическое положение: Волгоградская область, Калачевский район,
Правый берег реки Дон, Красная балка.
Микрорельеф: надпойменная терраса.
Мезорельеф: склон балки.
Тип почв: лугово-каштановые.
Мощность подстилки: 0,7см.
Структура плотная
Механический состав: легкий суглинок.
Площадь ценопопуляции: 300м².
Длина территории ценопопуляции по наибольшей длинной оси: 20м.
Ширина территории ценопопуляции по наибольшей длинной оси: 18м.
1-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 50%-4б | Колошение |
| 2.Лапчатка серебристая | 4%-1б | Бутонизация |
| 3.Веснянка | 4%-1б | Вегетация после цветения |
| 4.Люцерна желтая | 1%-1б | Бутонизация Цветение |
| 5.Полынь | 1%- 1б. | Вегетация. |
Общее покрытие: 5б- 100%
Проективное покрытие изучаемого вида: 4б- 40%
Спектр возрастных состояний:
| %п /п | Проростки, p | Ювенильные, j | Имматурные im | Виргинильные, v | Генеративные, g | Сенильные, s | Всего |
| 1. | 9 | 13 | 10 | 3 | - | - | 33 |
Морфометрические измерения
| №п/п | Высота | Кол-во листьев | Диаметр | Длина листа | Ширина листа | Высота цветоноса | Диаметр цветка | Кол-во цветков на раст. | Высота цветка |
| 1.1р | 13 | 14 | 8 | 13,9 9 7,8 8 12 | 0,5 0,4 0,3 0,4 0,5 | - | - | - | - |
| 2 р | 11 | 12 | 7,8 | 9 8,6 7 9,5 10,5 | 0,5 0,4 0,5 0,6 0,3 | - | - | - | - |
Вывод: растения находятся в угнетенном виде, под воздействием антропогенных и абиотических факторов.
2-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 70%-5б | Колошение |
| 2.Скабеоза иссетская | 13%-2б | Бутонизация |
| 3.Молочай прутьевидный | 7%-2б | Вегетация |
| 4.Ястребинка волосистая | 6%-2б | Вегетация |
| 5.Лапчатка серебристая | 4%- 1б. | Вегетация. |
На данной площадке исследуемого вида не обнаружилось.
3-я площадка
| Доминирующие виды. | Покрытие | Фенофаза |
| 1.Типчак | 20%-3б | Колошение |
| 2Люцерна желтая | 4%-2б | Цветение вегетация |
| 3.Тысячалистник | 6%-2б | Цветение |
| 4.Грудница | 6%-2б | Бутонизация |
| 5.Перловник | 3%- 1б. | Плодоношение |
| 6.Мятлик живородящий | 1%- 1б. | Плодоношение |
| 7.Полынь | 1%-1б | Вегетация |
| 8. Молочай прутьевидный | 1%-1б. | Вегетация |
Общее проективное покрытие: 90%
Проективное покрытие вида: 50%
Спектр возрастных состояний:
| %п /п | Проростки, p | Ювенильные, j | Имматурные im | Виргинильные, v | Генеративные, g | Сенильные, s | Всего |
| 3. | 10 | 11 | 13 | 5 | 4 | - | 43 |
Морфометрические измерения
| №п/п | Высота | Кол-во листьев | Диаметр | Длина листа | Ширина листа | Высота цветоноса | Диаметр цветка | Кол-во цветков на раст. | Высота цветка |
| 3.1р | 26 | 20 | 7,8 | 14 26 17 15 16,5 | 1 0,9 1,5 0,5 0,7 | - | - | - | - |
Вывод: растения на данной площадке чувствуют себя превосходно.
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | - | 1 | - | - | 1 | 1 | - |
Факторы антропогенного воздействия.
| Реакреация | Террасирование склонов | Выпас скота | сенокошение | пожары | Строительство | Сбор на букеты | Загрязнение отходами | Разработка мела |
| 1 | - | 1 | 1 | - | - | 1 | - | - |
Микроклональное размножение. Изолирование зародышей
Семена Ботанического Сада - круглые 5-6мм
Семена, привезенные с Калачевской популяции – мелкие 4мм.
Зародыши с белым эндоспермом.
| Дата закладки | Дата наблюдений | №п/п | Кол-во зародышей | Семена, привезенные с Калачевской популяции (незрелые). Показания | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 31.07.07 | 01.08.07 | 1.1 | 3 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.2 | 3 | 2 набухли | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.3 | 2 | Набухли оба | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.4 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.5 | 2 | Набухли оба | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.6 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.1 | 4 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.2 | 5 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 9.1 | 3 | Зеленый проросток 25мм с белым корешком | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 9.2 | 2 | Набухший светло-зеленый проросток с корешком в 1мм. Зеленый проросток с белым корешком. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 9.3 | 5 | 1.Без изменений 2.Без изменений 3.Зародыш набух 4Зародыш набух 5.Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 27.07.07 | 01.08.07 | 2.1 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.1 | 3 | Проросток в 2см,у основания белый, у конца светло-зеленый с набухшим в 3мм корешком. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 4.1 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.8 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.1 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5.1 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.1 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 8.1 | 3 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 7.1 | 4 | Проросток белого цвета с корешком 0,5см, набухший у основания. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.2 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 4.2 | 2 | Проросток в 2см, у основания светло-зеленый с корешком в 7см | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.9 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.2 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.2 | 2 | Проросток в 3см у основания белый, на конце светло-зеленый с белым корешком в 2,5мм. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5.2 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.2 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 7.2 | 3 | Зеленый проросток 5см с корешком в 1,5см | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.3 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.10 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.3 | 4 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5.3 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.3 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.4 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.5 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.4 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.5 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.6 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6.7 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5.4 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5.5 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5.6 | 3 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.4 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.5 | 3 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 31.07.07 | 02.08.07 | 1.3 | 2 | Проросток 0,1см светло-желтый | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.4 | 2 | Набухли оба | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.5 | 2 | Набухли оба | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.6 | 2 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.1 | 3 | 2 набухли | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.2 | 3 | 2 набухли | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.2 | 5 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.1 | 4 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 9.2 | 2 | 2 проростка: 1)0,9мм с корешком в 0,5мм 2)набухший зеленый в 0,2мм | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 9.1 | 3 | Проросток с 2-мя листочками в 2см и корешком в 4см. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 9.3 | 5 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 03.08.07 | 2.1 | 4 | Зародыш белый, прямой, до 3мм | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2.2 | 5 | Зародыш белый, прямой, до 3мм | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.1 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.2 | 3 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.3 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.4 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.5 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1.6 | 2 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 17.08.07 |
|
|
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 24.08.07 |
|
|
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ВРБС | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 31.07.07 | 01.08.07 | 3.1 | 4 | Набухли | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.2 | 7 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.3 | 8 | 2 набухли | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.4 | 6 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.5 | 6 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 02.08.07 | 3.1 | 4 | Без изменений | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.2 | 7 | 1 набухло | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.3 | 8 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.4 | 6 | 3 набухли | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.5 | 6 | 1 набух | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 03.08.07 | 3.1 | 4 | Зародыши белые, прямые, до 5мм | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.2 | 7 | Зародыши белые, прямые, до 5мм | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.3 | 8 | Зародыши белые, прямые, до 5мм | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.4 | 6 | Зародыши белые, прямые, до 5мм | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.5 | 6 | Зародыши белые, прямые, до 5мм | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 17.08.07 | 3.1 | 4 | 1)До 10мм, в виде изогнутой палочки, светло-зеленого цвета 2)До 4мм, светло-зеленый, толстый 3)Листочек до 20мм с корешком. 4) 6мм, светло-зеленый, тонкий | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.2 | 7 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.3 | 8 | 4 зародыша набухли, со светло-зеленым кончиком, до 5мм, толстый, 4 без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.4 | 6 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.5 | 6 | 3 без изменений, 1-й проросток в виде зеленой пластинки в 4мм, 2-й-2 листочка до 30мм. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 24.08.07 | 3.1 | 7 | 1)4 листочка до 4,5см с длинным корешком 2),3),4) Без изменений | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.2 | 7 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.3 | 8 | Без изменений | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.4 | 6 | 1-й проросток зеленого цвета, в виде розетки из белых листьев, до 10см, остальные без изменений. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3.5 | 6 | Без изменений |
0 комментариев