4. Методы выделения ферментов
Классические методы. Экстрагирование ферментов из биологического материала. Кислотная обработка, термическая обработка, фракционирование солями, органическими растворителями, ионообменная хроматография, гельфильтрация, электрофорез. Аффинная хроматография, носители и лиганды. Комбинирование различных методов для очистки ферментов. Критерии чистоты ферментных препаратов.
Иммобилизованные ферменты. Методы получения. Изучение свойств иммобилизованных ферментов.
5. Кинетические параметры и физико-химические свойства очищенных форм ферментов
Кинетика ферментативного катализа. Методика определения максимальной скорости ферментативной реакции. Определение константы Михаэлиса. Различные способы графического определения константы Михаэлиса и максимальной скорости реакции. Влияние концентрации фермента на скорость ферментативной реакции. Влияние концентрации субстрата. Влияние температуры и рН среды на скорость ферментативных реакций. Ингибиторы ферментов и их классификация. Конкурентное, неконкурентное, бесконкурентное, смешанное ингибирование. Способы определения типа и константы ингибирования.
Специфичность действия ферментов. Основные типы специфичности. Проявление специфичности на примере различных ферментов.
Список основной литературы
1. Кретович В.Л. Введение в энзимологию. – М.: Наука, 1986. – 332 с.
2. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. – М.: Мир, 1982. – Т. 1 – 3.
3. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. – М.: Мир, 1980. – 432 с.
4. Фридрих П. Ферменты: четвертичная структура и надмолекулярные комплексы. – М.: Мир, 1986. – 374 с.
5. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. – М.: Высш. школа, 1980. – 272 с.
6. Практикум по биохимии/ под ред. С.Е. Северина и Г.А. Соловьёвой. – М.: МГУ, 1989. – 509 с.
Список дополнительной литературы
1. Курганов Б.И. Аллостерические ферменты. – М.: Наука, 1978. – 248 с.
2. Корниш-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики. – М.: Мир, 1979. – 280 с.
3. Тривен М. Иммобилизованные ферменты. – М.: Мир, 1983. – 293 с.
4. Бернхард С. Структура и функция ферментов. – М.: Мир, 1971. – 334 с.
Требования к уровню освоения программы
В результате изучения данной дисциплины студент должен
знать классификацию и номенклатуру ферментов, их строение и механизмы функционирования, а также современные методы работы с ферментами.
уметь применять приемы номенклатуры ферментов, давать характеристику важнейшим из них.
владеть приемами и навыками работы с ферментами.
Перечень вопросов к зачету
Способы количественного выражения ферментативной активности. Общая активность, удельная активность, молекулярная активность, активность каталитического центра.
Современные методы: химические, электрохимические, фотометрические, спектрофотометрические, флюориметрические.
Органная специфичность распределения ферментов. Изучение органного распределения ферментов.
Специфичность распределения ферментов в тканях: нервной ткани, мышцах, печени, соединительной ткани (крови), пищеварительной системе. Цитология ферментов.
Методика фракционирования ткани по субклеточным структурам. Изучение субклеточной локализации ферментов.
Определение ферментов-маркеров лизосом, митохондрий, пероксисом, ядра, микросомальной фракции.
Кинетика ферментативного катализа.
Методика определения максимальной скорости ферментативной реакции.
Определение константы Михаэлиса.
Различные способы графического определения константы Михаэлиса и максимальной скорости реакции.
Влияние концентрации фермента на скорость ферментативной реакции. Влияние концентрации субстрата.
Влияние температуры и рН среды на скорость ферментативных реакций. Ингибиторы ферментов и их классификация.
Способы определения типа и константы ингибирования.
Специфичность действия ферментов.
Основные типы специфичности.
Проявление специфичности на примере различных ферментов. Экстрагирование ферментов из биологического материала.
Комбинирование различных методов для очистки ферментов.
Критерии чистоты ферментных препаратов.
Иммобилизованные ферменты. Методы получения. Изучение свойств иммобилизованных ферментов.
Сведения о переутверждении программы на очередной учебный год и регистрации изменений
| Учебный год | Решение кафедры | Внесенные изменения | Номера листов (страниц) | ||
| заменен-ных | новых | аннули-рованных | |||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «__» __________ 20__г. Зав. кафедрой ______________ | ||||
| 20__/20__ | Протокол № ____ от «__» __________ 20__г. Зав. кафедрой ______________ | ||||
Программу составил:
... работы Консультации Зачет Экзамен Сам ра бота Конт-рольные работы лекции лабораторные занятия 7 34 34 + + + Итого: 34 34 + + + СОДЕРЖАНИЕ ДИСЦИПЛИНЫ 1.Введение Предмет биохимии мышечного сокращения. Задачи и содержание курса. Краткий исторический обзор. Значение биохимии мышечного сокращения как учебного предмета ...
... является курсом, для изучения которого необходимо наличие знаний об основных принципах организации биологических молекул, строении и механизмах действия ферментов. Дисциплина биохимия мембран относится к дисциплинам специализации федерального компонента. 5. Распределение времени, отведенного на изучение дисциплины по учебному плану Форма учебной работы Форма обучения Очная По ...
... молочных продуктов при хранении – 2 ч. 8. Биохимические функции, строение и состав мышечной ткани – 6 ч. 9. Биохимия созревания мяса – 6 ч. Всего 26 ч. Темы лабораторно-практических занятий 1. Определение основных компонентов, биохимических и физико-химических показателей молока 6 ч. 2. Определение биохимических и физико-химических показателей при обработке молока и выработке ...
... составлена в соответствии с Государственным образовательным стандартом Высшего профессионального образования для студентов, обучающихся по специальности 020208 – «Биохимия». 4. Место дисциплины в профессиональной подготовке студентов Курс «Энзимология» предшествует изучению студентов курсов кинетики и термодинамики ферментативных реакций. Он имеет основополагающее значение, поскольку главным ...
0 комментариев