Исследование отделяемого женских половых органов

Федеральное агентство по здравоохранению

и социальному развитию

Ставропольская государственная

медицинская академия

Факультет последипломного образования

Реферат

Тема: Исследование отделяемого женских половых органов

Научный руководитель:

д. м. н., профессор

Первушин

Выполнила:

Курсант цикла

"Клиническая лабораторная диагностика "

Бороздина И.Б.

Ставрополь, 2008 г.

Содержание

Введение

Глава I. Теоретические основы исследования отделяемого женских половых органов

Глава II. Характеристика неспецифических и специфических фолновых процессов влагалища, шейки матки и полости матки

Заключение

Введение

Гинекологическое исследование - совокупность методов исследования, с помощью которых определяют анатомо-функциональное состояние половой сферы и выявляют заболевания половых органов.

Актуальность проблемы исследования гинекологических мазков вызвано тем, что рак тела и шейки матки по частоте занимают одно из первых мест среди злокачественных новообразований у женщин.

В настоящее время во всех экономически развитых странах отмечается уменьшение заболеваемости раком шейки матки. Основное направление борьбы с этим заболеванием заключается в активном его выявлении при массовых профилактических осмотрах практически здоровых женщин, а также своевременная диагностика и рациональное лечение фоновых и предраковых заболеваний шейки матки, что осуществляется в женских смотровых кабинетах и женских консультациях.

Смотровой женский кабинет входит в состав отделения профилактики. Задачами кабинета являются осуществление профилактического осмотра женщин с 18 лет с целью раннего выявления гинекологических заболеваний, предопухолевых и раковых заболеваний женских половых органов и других видимых локализаций (кожи, молочных желёз).

Активное выявление онкологических больных особенно с начальными формами рака в доклинической стадии болезни является основным принципом гинекологии и онкологии.

С позиций активного выявления дисплазий и раннего рака шейки матки важнейшее значение приобретает организационные вопросы проведения массовых гинекологических осмотров, одним из которых является рациональная организация цитологической службы, призванной обеспечить максимальную эффективность осмотров путём проведения цитологических исследований у каждой осмотренной женщины.

Проведение массовых гинекологических профилактических осмотров включает в себя 2 основные задачи:

Ранние и своевременные выявления рака шейки матки, в том числе и в доклинической стадии процесса.

Определение различных неопухолевых заболеваний, требующих активного лечения.

Выполнение указанных задач ведёт к снижению заболеваемости раком, уменьшению числа запущенных форм и улучшению результатов лечения.

Профилактические осмотры женщин проводятся не реже 1 раза в год акушеркой или врачом - гинекологом смотровых кабинетах при поликлиниках, на предприятиях, а также при диспансеризации лиц, работающих в условиях профессиональной вредности.

Глава I. Теоретические основы исследования отделяемого женских половых органов

Материалом для исследования чаще всего служат отделяемое влагалища, мазки с поверхности шейки матки, мазки из цервикального канала и отсосы из полости матки.

Исследуют также мазки - отпечатки, соскобы со слизистой оболочки женских половых органов.

Исследование может проводиться в динамике как в стационарных, так и в лабораторных условиях.

Приготовление и окраска препаратов.

Мазки берут из верхне-боковой части свода влагалища. Свободно отторгающийся материал наносят на край предметного стекла и лёгким движением размазывают ребром другого шлифованного стекла.

Перед окраской мазок просушивают на воздухе.

В качестве фиксатора используют 96° этиловый спирт, смесь Никифорова, состоящей из равных частей 96° этилового спирта и эфира, раствор Лейшмана (состоящим из 1 л. метанола и 2, 5 г. краски Лейшмана), а также фиксируют над пламенем горелки.

Окраска мазков. Существуют мономорфные и полиморфные методы окраски мазков.

При полиморфных методах окраски клетки, в зависимости от их типа и физико-химических свойств цитоплазмы, окрашиваются дифференцированно в красно - оранжевый или сине - зелёный цвета.

Мономорфные методы.

Окраска гематоксилин - эозином. Мазок подсушивают на воздухе, фиксируют в смеси Никифорова или в 96° этиловом спирте в течение 7 - 10 мин. Затем окрашивают водным раствором гематоксилина (гематоксилин - 1, 0 г., калийные квасцы - 50, 0 г., йодид натрия - 0, 2 г., дистиллированная вода - 1000 мл. Раствор выдерживают на свету 14 дней, после чего он готов к употреблению). В течение 7 - 10 мин до получения слабо - фиолетового окрашивания. Далее мазок промывают проточной водой и окрашивают 0, 3% спиртовым раствором желтоватого эозина или 1% водным раствором эозина в течение 1 минуты. Затем снова промывают проточной водой и высушивают.

Окраска метиленовым синим. На подсушенный препарат наносят 1 - 2 кап.1% водного раствора метиленового синего и накрывают его покровным стеклом. Через 1 - 2 мин препарат промывают дистиллированной водой до обесцвечивания, которое производится следующим образом: на один край мазка наносят 1 - 2 капли дистиллированной воды, а к другому подносят фильтровальную бумагу. Затем высушивают и микроскопируют.

Окраска фуксином. На подсушенный препарат наносят на 1 мин. Раствор фуксина (3 г. фуксина растворяют в 1 л.96° спирта и к 12 мл. этого раствора добавляют 100 мл дистиллированной воды). Затем промывают водой, просушивают и микроскопируют.

Методика окраски по Лейшману. Высушенные на воздухе препараты заливают краской Лейшмана на 3 мин., при этом препарат одновременно фиксируется. После этого промывают водопроводной водой и заливают азур - эозиновой смесью (40 мл.0, 1% азура II и 30 мл.0, 1% эозина К) на 15 - 20 мин. Затем промывают водопроводной водой, высушивают на воздухе и микроскопируют.

Методика окраски по Романовскому. Фиксированные 96° спиртом или смесью Никифорова мазки заливают рабочим раствором краски Романовского - Гимзы на 20 - 25 мин. Затем промывают проточной водой и высушивают.

Полихромные методы.

Окраска по Папаниколау. Мазки фиксируют в смеси Никифорова 25 мин., после чего проводят их через серию спиртов, понижающей концентрации: 96°, 80°, 70° и дистиллированную воду (в каждом растворе мазки следует прополоскать). Далее мазки окрашивают гематоксилином Гарриса или Боммера в течение 50 мин. Промывают в 2 сосудах с дистиллированной водой 1 - 2 секунды и дифференцируют в 3% растворе едкого аммония (1 мин). После дифференцирования мазки проводят через спирт, повышающей концентрации: 70° (дважды), 80°, 95°. Окрашивают раствором с красителем оранж G (1 мин) и проводят через 2 сосуда с 70° спиртом. Затем мазки окрашивают полихромным красителем 1, 5 минуты и проводят через 95° спирт в 3 сосудах, затем через смесь равных частей абсолютного спирта и ксилола. Через ксилол (1 мин) и помещают в канадский бальзам.

Окраска по Докумову. Влажные мазки фиксируют в течение 30 мин смесью Никифорова, после чего, не подсушивая, наливают на них гематоксилин на 2 - 3 мин, после чего сливают и промывают мазки проточной водой. Далее мазки окрашивают полихромным красителем в течение 1 - 2 минут, затем его сливают, промывают препараты 70° и 95° спиртом, высушивают и помещают в канадский бальзам.

Во время всех этапов окраски мазки не должны высыхать.

Полихромный краситель: эритрозин - 0,25 г, лихтгрюн - 0,2; фосфорно-вольфрамовая и фосфорно-молибденовая кислоты по 0,2; оранж G - 0,1 г; ледяная уксусная кислота - 1 г; этиловый спирт - 50° - 100 мл.

Раствор красителя выдерживают в течение нескольких дней для созревания.

Морфологические особенности эпителия влагалища.

В состав эпителиальных клеток отделяемого влагалища в норме, подобно гистологической структуре покровного многослойного плоского эпителия влагалища и влагалищной части шейки матки отражает состояние функции яичников.

При пролиферативной фазе многослойный плоский эпителий достигает толщины 300 - 400 мкм, имеет хорошо выраженные признаки вертикальной анизоморфности, и состоит из трёх слоёв: базального, промежуточного и поверхностного.

При секреторной фазе менструального цикла многослойный плоский эпителий имеет толщину до 200 мкм. Часть клеток функционального слоя над сосочками слущена. Гликоген обнаруживается в виде незначительных скоплений в отдельных клетках промежуточного и функционального слоёв. В подэпителиальном сосочковом слое соединительной ткани видны скопления лимфоидных клеток и гистиоцитов.

При десквамативной и регенеративной фазах наблюдается слущивание большей части клеток функционального и промежуточного слоёв. Сохраняющийся на поверхности слизистой оболочки многослойный пласт нащитывает всего 4 - 12 слоёв и толщину до 42 - 96 мкм.

У женщин, находящихся в климактерическом периоде и менопаузе, многослойный плоский эпителий подвергается атрофии.

Рассмотрим структуру клеток многослойного плоского эпителия.

Клетки поверхностного эпителия крупные (диаметром от 40 до 50 мкм), в основном полигональные, реже - округлые или овальные с чёткими границами. Ядра клеток центрально расположеные, мелкие, интенсивно окрашенные, пикнотичные, диаметром не более 6 мкм. Цитоплазма светло - голубая при окраске по Лейшману, Романовского-Гимза и обнаруживаются мелкие вакуоли.

Большое количество клеток эпителия с пикнотичными ядрами свидетельствует о высокой эстрогенной активности. Наиболее богаты мазки клетками поверхностного эпителия в поздней фолликулиновой фазе.

Клетки промежуточного слоя многослойного плоского эпителия в норме составляет не более 10%. Форма их полигональная или овальная. Диаметр клеток 25 - 30 мкм. Цитоплазма окрашена базофильно. Ядерно-цитоплазматическое соотношение увеличено. Форма ядер пузырьковидная, округлая или овальная. Хроматин нежно - сетчатый или нежно - зернистый. Клетки располагаются разрозненно и в виде пластов разной величины.

Так как под влиянием палочек Додерлейна возможен цитолиз клеток, то в мазках обнаруживаются голые ядра.

Клетки нижних рядов промежуточного слоя относятся к парабазальным и составляют не более 5% всех клеток эпителия. Они разного размера (от 12 до 30 мкм), округлой, овальной или полигональной формы. Ядра их по величине аналогичны ядрам клеток промежуточного слоя. Цитоплазма окрашена базофильно, содержит вакуоли.

Особую группу клеток промежуточного слоя эпителия составляют так называемые ладьевидные клетки. Встречаются при беременности. Форма их вытянутая, ядра располагаются эксцентрично, цитоплазма богата гликогеном и под влиянием бактерий подвергается цитолизу.

Преобладание клеток промежуточного слоя наблюдается в начале фолликулиновой и во время лютеиновой фаз, послеродовом периоде, в менопаузе, и указывает на недостаточность эстрогенных гормонов.

Увеличение количества парабазальных клеток может свидетельствовать о патологическом процессе в шейке матке.

Парабазальные клетки имеют округлую, овальную, иногда полигональную форму с чёткими границами, диаметр клеток в пределах

30 мк. Ядра имеют нежную тонкопетлистую или мелкозернистую сеть хроматина; иногда видно ядрышко. Цитоплазма резко базофильна, гликоген выявляется не всегда.

Парабазальные клетки могут обнаруживаться в мазках из влагалища в период менструации и в период менопаузы.

Базальные клетки многослойного плоского эпителия мелкие, ядерно-цитоплазматическое соотношение равно 1: 3. Ядро округлое, хроматин мелкозернистый, содержит 1 - 2 ядрышка. Цитоплазма в виде узкого ободка, резко базофильна.

В мазках здоровых женщин базальные клетки появляются только в период менопаузы. Появление в мазках значительного числа парабазальных и базальных клеток характерно для патологического процесса шейки матки.

В мазках из влагалища наряду с эпителиальными клетками могут быть и другие элементы, в частности, эритроциты, лейкоциты. Особенно много лейкоцитов выявляется после менструации. Их можно обнаружить в мазках в период менопаузы.

Эндоцервикс в норме выстлан высоким призматическим эпителием, содержащим слизь, под которым на базальной мембране находятся резервные клетки. Призматический эпителий эндоцервикса меняется в зависимости от фаз овариально-менструального цикла.

При пролиферативной фазе менструального цикла клетки призматического эпителия имеют базальное расположение ядер, наибольшая высота призматических клеток (до 30 - 36 мк ) наблюдаются при секреторной фазе. При этом ядра клеток призматического эпителия перемещаются в их центр. Отмечается гиперплазия резервных клеток с образованием солидных и железистых структур. В фазе регенерации эпителий слизистой оболочки эндоцервикса низкопризматический.

В период климакса и менопаузы отмечаются эпидермизация эндоцервикса, кистозное расширение желёз и атрофия призматического эпителия, особенно в области кист. Резервные клетки встречаются редко. Значительное число резервных клеток, выраженная их пролиферация с образованием многослойных пластов, метаплазированного многослойного плоского эпителия, новообразованием желёз отмечается в период беременности и при дисгормональных нарушениях.

При цитологическом исследовании мазков из цервикального канала обнаруживаются эпителиальные клетки слизистой оболочки разной величины. Они расположены изолированно или в виде групп железистоподобных структур, имеющих призматическую форму; овальные или круглые ядра с нежным мелкодисперсным хроматином. Цитоплазма клеток слабо базофильная, в апикальной части содержит зёрна слизи.

Наряду с клетками секреторного призматического эпителия встречаются реснитчатые клетки; реснички хорошо выражены на апикальной поверхности. В ряде случаев эпителиальные клетки в мазке располагаются не вдоль тела клетки, а поперёк. При этом клетки выглядят округлыми или полигональными, а ядра расположены центрально. В мазках могут обнаруживаться и резервные клетки призматического эпителия. Резервные клетки округлой формы, со скудной бледно окрашивающейся цитоплазмой и круглым ядром, занимающим почти всю цитоплазму. Хроматин ядра нечеткий. При исследовании мазков, взятых у женщин в секреторной фазе менструального цикла, во время беременности и при дисгормональных изменениях можно обнаружить клетки метаплазированного многослойного плоского эпителия, которые похожи на клетки многослойного плоского эпителия. Однако цитоплазма их содержит слизь или гликоген и слизь.

При беременности наряду с подобными эпителиальными элементами нередко отмечаются и децидуальные отпадающие клетки.

В мазках содержимого влагалища здоровой, зрелой в половом отношении женщины бактериальная флора обычно представлена грамположительными палочками Дедерлейна, относящимися к роду Lactobacillus.

Влагалище новорождённых примерно в половине случаев стерильно. В ближайшие часы после рождения появляется скудная кокковая флора. До наступления половой зрелости у девочек так же, как и у женщин в менопаузе, в содержимом влагалища наблюдается кокковая флора. При достижении половой зрелости (с появлением менструаций) микрофлора влагалища становится палочковидной.

В зависимости от микрофлоры и характера клеточного содержимого различают 4 степени чистоты влагалища.

Первая степень. В содержимом влагалища присутствуют палочки Дедерлейна, нередко расположенные по две рядом, и эпителиальные клетки, возможно наличие единичных лейкоцитов и слизи; рН 4,0 - 4,5. Такая картина содержимого влагалища здоровой женщины встречается редко.

Микроскопически выделения имеют вид хорошо сваренного крахмала.

Вторая степень. Палочек Дедерлейна меньше, появляется кокковая флора, наблюдаются эпителиальные клетки, часто лейкоциты, большое количество слизи; рН 5,0 - 5,5. Микроскопически выделения полужидкие, белесоватые. Подобное содержимое влагалища встречается чаще всего.

Третья степень. Незначительное количество палочек Дедерлейна, разнообразная кокковая флора (в том числе стрепто- и стафилококки), в изобилии coma variabile. Много лейкоцитов, есть эпителиальные клетки; рН 6,0 - 7,2. Макроскопически содержимое влагалища желтоватое, жидкое. Такая картина характерна для воспалительного процесса в половых органах.

Четвёртая степень. Палочки Дедерлейна отсутствуют; обнаруживается большое количество лейкоцитов, разнообразные микроорганизмы (стафило - , стрептококки, кишечные палочки, иногда трихомонады); рН свыше 7,2. Микроскопически - обильный желтый гнойный секрет, при трихомонадном кольпите пенистый. Эта степень чистоты влагалищного содержимого характерна для ярко выраженного воспалительного процесса.

Выделяют также нулевую степень чистоты, при которой микроорганизмы отсутствуют, но есть лейкоциты. Такая картина влагалищного содержимого наблюдается после лечения сульфаниламидными препаратами, антибиотиками, а также после спринцевания.

 

Глава II. Характеристика неспецифических и специфических фолновых процессов влагалища, шейки матки и полости матки

 

Исследования на трихомонады.

Трихомонады - Одноклеточные паразиты грушевидной или овальной формы, немного крупнее лейкоцитов. Один конец трихомонады заострён и имеет четыре жгутика.

Трихомонады могут обнаруживаться во влагалище женщин и девушек, в мочеиспускательном канале, мочевом пузыре и прямой кишке. Они могут присутствовать в виде цистоидных (неподвижных, без жгутиков), более устойчивых форм.

Влагалищные трихомонады патогенны, являются возбудителями вагинального кольпита, цервицита, уретрита.

При трихомониазе выделения из влагалища жидкие, беловато - желтого цвета, пенистые. Больные жалуются на зуд в области половых органов.

В нативном препарате влагалищные трихомонады обнаруживаются легко, особенно если они подвижны.

Трихомонады можно окрашивать фуксином, красителем Романовского, метиленовым синим и др. Лучше всего они окрашиваются красителем Романовского. При этом влагалищные трихомонады имеют вид овальных клеток с пенистой протоплазмой, окрашенной в голубой цвет, и бледно - фиолетовым блефаробластом.

Исследование на гонококки.

При подозрении на гонококковую инфекцию у женщин исследуют отделяемое канала шейки матки и мочеиспускательного канала. Мазок окрашивают по Грамму.

Окраска по Грамму требует особой тщательности, так как при недостаточном обесцвечивании гонококки могут сохранять окраску Грамма. При слишком длительном обесцвечивании окраску Грамма могут терять другие грамположительные кокки (стафилококки, стрептококки). Это может привести к ошибочным результатам.

Способ окраски по Грамму.

Реактивы.1. Карболовый раствор генцианвиолета.