Т-памяти – циркулируют в крови и могут распознать антиген даже спустя годы. Сразу после этого включают выработку Т-эффекторов

2.         Т-памяти – циркулируют в крови и могут распознать антиген даже спустя годы. Сразу после этого включают выработку Т-эффекторов.

В-лимфоциты – клетки ответственные за гуморальный иммунитет. Они вырабатывают антитела – иммуноглобулины к конкретному антигену. Стимулирует этот процесс лимфокаины Т-хелперов и монокаины (интерлейкин-1), вырабатываемые моноцитами. Также есть В-лимфоциты памяти.

Возрастная динамика содержания лейкоцитов:

·           1-е сутки после рождения – нейтрофилов 70%, лимфоцитов –25%;

·           5-6-е сутки – первый перекрест : и лимфоцитов и нейтрофилов – 40-45%;

·           в дальнейшем лимфоциты повышаются, анейтрофилы – понижаются;

·           5-6 лет – второй перекрест 40-45%;

·           в дальнейшем количество нейтрофилов и лмфоцитов становится как у взрослы.

Тромбоциты – кровяные пластинки – плоские безядерные клетки округлой формы, диаметром 1-4 мкм. Образуются в костном мозгу из мегакариоцитов.

Количество – 150-300 тыс/мм³ крови.

Циркулируют в крови 5-11 дней.

Стимулируют тромбоцитопоэз тромбопоэтины, вырабатываемы в почках.

В крови тромбоциты находятся в неактивном состоянии. Активируются при соприкосновении с поврежденной поверхностью сосуда и сразу образуют тромбоцитарную пробку – создают агрегацию клеток. Выделют тромбоксаны, особые вещества, способствующие агрегации.

Гемостаз – свертывание крови

Гемостаз проходит в две фазы:

1. Сосудистый гемостаз или первичный – сужение сосуда и адгезия (прилипание) тромбоцитов к поврежденной поверхности. Происходит образование агрегаций тромбоцитов (тромбоцитарная пробка). В это время из гранул тромбоцитов выделяются сосудосуживающие вещества – серотонин, катехоламины и АДФ (образующийся из АТФ). Оразуется обратимая агрегация. Одновременно с этим процессом выделяется небольшое количество тромбина, превращающего фибриноген в фибрин и тром стоновится необратимым. Процесс длится 1-3 минуты. Его достаточно для мелких сосудов.

2. Коагуляционный или вторичный гемостаз. Эта фаза включается почти одновременно с первичной.в этом процессе участвует 12 факторов свертывания крови. Выделяют две системы:

·          внешняя тканевая – активируется в течение нескольких секунд;

·          внутрення плазменная – активируется в течение нескольких минут.

Обе системы активируют фермент протромбиназу (часть этапов активации идет с участием IV фактора – кальция). Протромбиназа активирует протромбин, превращая его в тромбин. Затем тромбин активирует фибриноген – фибрин. Фибрин пронизывает тромб (какбы цементирует). Вначале фибрин растворимый, а затем переходит в нерастворимый. Через несколько часов волокна фибрина сжимаются (ретракция тромба) под воздействием белка тромбостенина (выделяется тромбоцитами).

3.         Фибринолиз – процесс разрушения тромба для восстановления кровотока. Существует также две системы активции плазминогена в плазмин: внешняя (тканевая) и внутренняя (плазменная). Плазмин разрушает фибрин.

Физиологические антикоагулянты поддерживают кровь в жидком состоянии и ограничивают процесс тромбообразования . К ним относятся антитромбин, гепарин, протеины “С” и “S”, простоциклин.

Группы крови

Если смешать на предметном стекле кровь разных лиц, то в большинстве случаев произойдет реакция агглютинации (склеивание аритроцитов) и последующий гемолиз. который если это произойдет в кровеносном русле организма, то это приведет к:

·          Закупорка капиляров глыбками эритроцитов;

·          Повреждение в первую очередь почечных канальце;

·          Выход гемоглобина в плазму повысит вязкость – АД

·          Выход токсических веществ вызовет повышение температуры – озхноб.

Разовьется гемотрансфузионный шок – смерть.

На мембране эритроцитов находятся полисахаридно-аминокислотные комплексы, которые являются антигенами или агглютиногены или гемагглютиногены. Другими словами – это вещества, которые несут информацию о своем организме.

В плазме находятся гамма-глобулины – антитела или агглютинины или изогемагглютинины. Они либо вырабатываются В-лимфоцитами в ответ на контакт с антигеном либо врожденные. Большинство антител это Ig M и Ig G. Обладают участками способными связывать антигены и склеивать эритроциты, а также вызывать их гемолиз.

На современном этапе известно около 400 антигенов (500 млрд. комбинаций). 30 из них встречается достаточно часто (300 млн комбинаций).

Все антигены объединены в системы групп крови. 9 наиболее часто встречаемых:

АВО, Rh, MNSs, P, Лютеран, Килл, Льюис, Даффи, Кидд.

По системе АВО выделяют тир типа антигенов. Исходным является антиген Н, который присутствует в эритроцитах группы О(I). Из него формируются антигены А и В.

Только по системе АВО есть готовые антитела анти А(α) и анти В(β). У новорожденных антител нет. Они появляются в течение первого года жизни (3-4 месяца). Титр антител достигает максимума к 13-14 годам. Причина выработки? Есть предположение, что антитела вырабатываются на антигены микрофлоры кишечника либо с пищей. В настоящее время выясено, что в кишечнике есть бактерии несущие такие же антигены (А или В), что и эритроциты. На антигены, присутствующие в крови на мембране своих эритроцитов антитела не вырабатываются!

Анти А(α) и анти В(β) антитела являются полными Ig M, которые имеют 10 участков, способных связывать антигены.

При переливании крови учитываеют системы АВО и Rh потому что:

·          Имеют наибольшее распространение на земном шаре;

·          Антигены обладают наибольшей агглютинирующей способностью;

·          По системе АВО есть готовые антитела и уже первое переливание несовместимой крови приведет к гемотранссфузионному шоку.

 

Характеристика системы АВО

Открыл Ландштейнер в 1901 году

Группа	Эритроциты (антигены)	Плазма (антитела)
О (I)	О(Н)	Анти А-α, антиВ - β
A (II)	А	Аьти В -β
B (III)	В	Анти А -α
AB (IV)	АВ	нет

 

Наследование групп крови по системе АВО

 

Генотип	фенотип	А и В доминантные. При определении отцовства – 10% ошибок. Антиген А имеет два подвида. Более сильный А1 – 80%, Более слабый – А2 – 20%
ОО	О
ОА или АА	А
ОВ или ВВ	В
АВ	А, В, АВ

Географическое распределение

 

Центральная Европа	40% А	Антигенные свойства Н антиген не велики и их при переливании крови не учитывают.
	40% О
	10% В
	6% АВ
Индейцы Северной Америки	90% О
Центральная Азия	20% В

По системе АВО конфликтов при беременности в большинстве случаев не наблюдается, т.к. антитела полные, больших размеров и не могут проийти через гематоплацентарный барьер. Однако в последние годы встречаются случаи выработки антител на антигены А или В, а также повышенный титр антител на антиген Н и возможны случаи конфликтов по системе АВО.

Система Rh.

Rh-фактор – антиген эритроцитов был открыт в 40-е годы 20 столетия у мака резус (отсюда и название) Ландщтейнером и Янским.

Это не один антиген, а целый ряд C, D, E, c,d,e. Наиболее активным или сильным явялется антиген D. Поэтому принято учитывать именно этот антиген. Кровь на мембране эритроцитов которой находится антиген D принято называть резус-положительной Rh+ (это 85% населения планеты). Остальные 15% не содержат этого антигена и их кровь называют резус-отрицательной Rh-.

Антитела на резус фактор не выявляются после рождения, а вырабатываются после первой сесибилизации, т.е. попажания резус-фактора в резус-отрицательную кровь. Выработанные антитела являются IgG, неполные антитела, поэтому они способны проходить через гематотканевые барьеры.

Резус-конфликты.

·          При переливании крови: первое переливание резус-положительной крови резусотрицательному реципиенту вызовет только выработку антител. Агглютинации не будет. Второе переливание вызовет агглютинацию, т.к. в крови уже будут готовые антитела (агглютинины анти D).

·          При беременности : если у матери резус-отрицательная кровь, а у плода резус-положительная, то во время первой беременности (если она протекает без патологии и нарушений гематоплацентароного барьера ) ничего происходить не будет. Кровь матери не смешивается с кровью плода и он развивается нормально. Однако вов ремя родов происходит смешивание крови матери крови плода, еритроциты плода, содержащие резус-фактор попадают в кровь матери. После родов у матери вырабатываются антирезусагглютинины (неполные антитела IgG). Во время второй беременности развивается резус-конфликт. Антителеа матери прохидят гематоэнцефалический барьер и взывают агглютинацию эритроцитов плода. Если титр-антител будет высоким, то наблюдаются выкидыши, если нет – то ребенок рождается с тяжелой гемолитической желтухой.

 

Определение групп крови

Для определения групп крови используют несколько методов.

·          Стандартных сывороток (сыворотка – это плазма крови без фибриногена) с изветсными агглютининами;

·          Стандартных эритроцитов с известными агглютиногенами;

·          Цоликлонов .

С помощью стандартных сывороток определяют наличие или отсутствие агглютиногенов в эритроцитах исследуемой крови. Берем каплю сыворотки и смешиваем её с кровью в соотношении 10(сыворотка) к 1(кровь) либо на прозрачной стеклянной поверхности, либо на специальной белой эмолированной поверхности, при температуре комфорта (20-25⁰С). При премешивании крови с сыворотками используем либо отдельные стеклянные палочки, либо углы предметного стекла, что бы не перемешать сыворотки.

Используют сыворотки групп О(I), A(II), B (III). Пример анализа:

+ - агглютинация произошла; - агглютинация не произошла.

 О(I) A(II) B (III).

			Если в исследуемой крови есть только один антиген В, то это группа В(III)

 

О(I) A(II) B (III).

			Если в исследуемой крови есть только один антиген А, то это группа A(II)

 

О(I) A(II) B (III).

			Если в исследуемой крови есть оба антигена и А и В, то это группа АВ (IV).

 

О(I) A(II) B (III).

			Если в исследуемой крови нет антигенов в эритроцитах, то это группа О(I)

 

Если же агглютинация произойдет тольк с одной из сывороток (либо спервой, либо со сторой, либо с третьей), то определить группу крови нельзя!

Необходимо применить методы контроля:

·          Группа методов по выявлению ложной агглютинации:

а) проврка чистоты поверхностей

б) соблюдение температурного режима

в) резведение физраствором (если ложная из-за большого количества крови – пропадет)

г) под микроскопом (ложная выглядит как монетные столбики, а истинная – в виде глыбок)

·          Группа методов по выявлению скрытой агглютинации:

а) просмотр капель без агглютинации под микроскопом. Могла произоити агглютинация слабая, т.к.к титр анител был низкий и подвид антигена обладал низкой способностью к агглютинации.

б) взять вторую серию сывороток с более высоким титром антител (обязятельно!)

Более надежным методом является метод циликлонов

Цоликлоны это специальные растворы, содержащие выработанные у животных (крыс чистой линии – клонов) соответствующие агглютинины – анти А и анти В. Гетероантитета, т.е. выработанные у особей другого вида обладают очень высокой агглютинирующей способность и при их использовании ошибок практически не бывает.

Название препаратов происходит от названия института, гда изобрали и изготовили эти растворы - Центральный Ордена Ленина Институт переливания крови в Ленинграде, сейчас – в Санкт-Петербурге. Клон – чистая линия мышей или крыс.

Цоликлон	Антитело	Результат	антиген
А	Анти –А	Есть агглютинация	Есть А
		Нет агглютинации	Нет А
В	Анти-В	Есть агглютинация	Есть В
		Нет агглютинации	Нет В

Для определения резус-фактора берут сыворотку универсальную (не содержит антител по системе АВО), содержащую анти-резус-агглютинин – анти-D. Либо сыворотку одногрупной по системе АВО крови. Смешиваем сыворотку и каплю крови также как и при определении групп крови по системе АВО. Результата наблюдаем через 10-15 минут.

Есть агглютинация – есть антиген, нет агглютинации – нет антигена.

 

Правила, которые необходимо использовать при переливании крови

1. Для переливания (особенно больших количеств) крови ипользуют только одногрупную кровь: у донора и реципиента должна быть одна группа.

2. Определяют группу крови реципиента и группу крови донора (даже полученную со станции переливания)

3. Проводят прямую пробу на совместимость, учитывая антигены донора (берут цельную кровь с эритроцитами) и антитела реципиента (берут сыворотку реципиента , которую получают путем центрифугирования крови).

4.         Проводят обратную пробу на совместимость, учитывая антигены реципиента (берут кровь реципиента) и антитела донора (берут сыворотку донора).

5.         Проводят биологическую пробу путём дробного вливаяния крови по 10мл трижды струйно по методу Безредко. Следят за самочуствием реципиента. При первых признаках нарушения самочуствия: озноб, боли в пояснице, холодный пот, учащение пульса, повышение АД – отключить капельницу с кровью и вливать физраствор или другой солевой раствор для разведения крови и уменьшеня её вязкости.

Основные физиологические требования к кровезамещающим растворам

 

1.      изотоничность – Росм раствора должно бать равно Росм крови. Первый изотоничный раствор – физраствор 0,9% раствор NaCl.

2.      изоионичность – раствор должен содержать не только соли натрия, но и другие ионы – кальций, калий, хлор. Существует целый ряд солевых растворов – дисоль, трисоль и т.д.

3.      обладать онкотическим давлением – содержать высокомолекулярные соединения, но не обладающие антигенной активность – коллоидные растворы - полтглюкин, реополюглюкин, гемодез.

4.      содержать питательные вещества – наиболее легко усваиваемая – глюкоза.