Фотоколориметрический метод

2.  Фотоколориметрический метод

Помещают 5 мл раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят до метки водой (раствор А).

К 5 мл раствора А прибавляют 1 мл 1% раствора железа(III) хлорида, 4 мл воды и перемешивают. Через 50 мин. измеряют оптическую плотность (А₁) окрашенного раствора при длине волны около 370 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм. Окраска устойчива 15–20 мин.

Раствор сравнения – смесь 1 мл 1% раствора железа (III) хлорида и 9 мл воды (готовят одновременно с окрашенным анализируемым раствором).

Параллельно в тех же условиях проводят реакцию с 5 мл раствора СО натрия ацетата (0,0026 г) и измеряют оптическую плотность (А₂).

2.3      Вывод

Из всех возможных методик количественного анализа данной лекарственной формы приведенного состава были выбраны:

– фотоколориметрия (для Натрия ацетата);

– аргентометрия по Мору (для Натрия хлорида).

Из всех возможных методик качественного анализа данной лекарственной формы приведенного состава были выбраны:

– образование осадка хлорида серебра (для хлорид-иона);

– окрашивание пламени горелки (для иона натрия);

– образование этилацетата (для ацетат-иона).

3. Экспериментальная часть

 

3.1      Специфичность

 

3.1.1   Установление специфичности в тестах «Испытание на подлинность»

Следует убедиться в отсутствии положительного эффекта реакции на сопутствующие вещества: другие ингредиенты лекарственного средства и вспомогательные вещества.

Практическое установление специфичности

Были приготовлены три модельные смеси состава:

Первая:

1.  Натрия хлорида 0,5 г

2.  Натрия ацетата 0,2 г

3.  Воды очищенной до 100 мл

Вторая:

1.  Натрия ацетата 0,2 г

2.  Воды очищенной до 100 мл

Третья:

1.  Натрия хлорида 0,5 г

2.  Воды очищенной до 100 мл

Для проведения валидационной оценки, с тремя модельными смесями были проведены следующие реакции:

1.  Хлорид-ион

К 0,5 мл модельного раствора прибавили по 0,5 мл HNO₃ разб. и раствор AgNO₃ 0,1М. Образовался белый творожистый осадок, растворившийся в растворе аммиака.

NaCl + AgNO₃ → NaNO₃ + AgCl↓

2.  Ион натрия

На шпатель была помещена капля раствора и внесена в пламя горелки. Наблюдалось окрашивание пламени в желтый цвет.

3.  Ацетат-ион

Упаривали 10 мл раствора на водяной бане до 1 мл, прибавляли 0,5 мл кислоты серной конц., 1 мл спирта этилового 96% и нагревали. Ощущался запах этилацетата.

CH₃COONa + CH₃CH₂OH → CH₃COOC₂H₅↑ + NaOH

3.1.2   Установление специфичности в тестах «Количественное определение»

Следует убедиться, что растворители и сопутствующие компоненты не вступают в реакцию с титрантом, а также необходимо удостовериться в специфичности индикатора.

1.  Для проведения специфичности Хлорида натрия использовали титриметрический метод анализа. Для чего брали три модельные смеси. Титрование проводилось по следующей методике: к 5 мл навески прибавляли 2 мл воды, 2 капли K₂CrO₄ и титровали 0,1М раствором AgNO₃ до появления оранжево-желтой окраски.

NaCl + AgNO₃ → AgCl↓ + NaNO₃

AgNO₃ + K₂CrO₄ → Ag₂CrO₄↓ + 2KNO₃

2.  Для проведения специфичности Ацетата натрия использовали фотоколориметрический метод анализа. Для этого использовали 3 модельные смеси. Определение проводилось следующим образом: помещали 5 мл раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили до метки водой (раствор А). К 5 мл раствора А прибавляли 1 мл 1% раствора FeCl₃, 4 мл воды и перемешивали. Через 50 мин измерили оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны около 490 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм. Параллельно готовили раствор сравнения – смесь 1 мл 1% раствора FeCl₃ и 9 мл воды. Параллельно в тех же условиях проводили реакцию с 5 мл раствора СО натрия ацетата (0,0026 г) и измеряли оптическую плотность.

Результаты испытания на специфичность представлены в таблице 1 и 2

Табл 1. Подлинность

	Модельные смеси
Компоненты	I	II	III
1.               Натрия хлорид	+	+	-
	белый осадок	белый осадок
2.               Натрия ацетат	+	-	+
	запах		запах

Табл 2. Количественное определение

	Модельные смеси
Компоненты	I	II	III
1.               Натрия хлорид	5,0 мл	4,8 мл	-
2.               Натрия ацетат	0,035	-	0,035

3.1.3   Вывод

По результатам экспериментов можно сделать заключение о специфичности выбранных методик определения подлинности и количественного определения.

3.2      Прецизионность (повторяемость)

Для установления повторяемости было проведено 6 параллельных определений содержания компонента в модельной смеси.

3.2.1   Опеделение прецизионности в тесте «Количественное определение» титриметическим методом

Для этого из модельной смеси 3 было отобрано 6 аликвот, которые оттитровали раствором нитрата серебра 0,1М. Результаты измерений представлены в таблице 3.

Табл 3. Результаты определения прецизионности титриметрическим методом

Vтит, мл	Найдено, Xi	Xi-	(Xi-)2	метрологические характеристики
4,1	4,79	-0,04167	0,001736	SD=0,065727
4,1	4,79	-0,04167	0,001736
4,1	4,79	-0,04167	0,001736
4,2	4,91	0,078333	0,006136	RSD=2,7%
4,2	4,91	0,078333	0,006136
4,2	4,91	0,078333	0,006136
	=4,85		∑=0,0216

SD= RSD= X_i=

T=M×Mм×

Mм=58,44

М=0,1М

K=1,00

P=1000 мл

a=5 мл