4. Определение напряженности иммунитета
Под напряженностью иммунитета следует понимать способность организма
рыб противостоять агрессивному влиянию возбудителей болезни и их продуктам
метаболизма и распада (экзо- или эндотоксинам). Напряженность иммунитета
отражает совокупную деятельность всех функциональных структур иммунной
системы рыб на уровне целостного организма.
Одним из объективных способов оценки напряженности иммунитета или
устойчивости рыб к паразитам, вызывающим инфекционные и инвазионные
болезни, является заражение рыб патогенными организмами или их токсинами.
Оценка напряженности иммунитета применяется в селекционной работе, при
определении эффективности вакцинации, последствий влияния благоприятных и
неблагоприятных для жизнедеятельности биотических и абитических (включая
токсические) факторов на выживаемость рыб.
4.1. Методика определения напряженности иммунитета (с ис-
пользованием a.hydrophila)
4.1.1. Принцип метода основан на экспериментальном заражении рыб
вирулентной культурой, вызывающей 50% или 10()%-нуто гибель исследуемого
вида рыб. Причем, в группе рыб с низким уровнем естественной резистентности
ld5o меньше, чем в группе рыб с более высоким уровнем напряженности
естественного иммунитета.
4.1.2. Оборудование и реактивы: аквариумы, пробирки, шприцы, рыба,
суточная культура вирулентных бактерий - возбудителя инфекционной болезни
рыб.
4.1.3. Материал для исследования, ход определения и учет результатов.
Отбирают 60 экз. рыб, имеющих средний для данной партии рыб показатель
навески. В заполненные водой (с температурой не ниже 18°С и не выше 26° С)
пять (и более) аквариумов или бассейнов с аэрацией или садки, установленные в
карантинном пруду, помещают по 25 экз. (из расчета не более 5 г ихтиомассы на 1
л воды) отобранных рыб, которым предварительно вводят внутрибрюшинно
одномиллиардную взвесь суточной вирулентной культуры бактерий a. hydrophila,
приготовленную на 0.65%-ном стерильном растворе натрия хлорида в дозах 0.125;
0.25; 0.5; 0.75; 1 мл (и более). Наблюдение за инфицированной рыбой ведут в
течение 10 суток с момента инъекции микробной взвеси и по вьккивае-мости
устанавливают дозу инфекта, вызывающую 50 или 100%-ную гибель рыб, с
характерными для данной инспекции клиническими и патоло-гоанатомическими
изменениями. Расчет летальной дозы, вызывающей 50%-ную гибель рыб (ld5o),
проводят по методу Рида и Менча (Гончаров, 1973).
Расчитанной дозой ld50 инфекта проводят заражение по 25 экз. исследуемых
рыб, относящихся к одному виду, возрасту, с одинаковой массой, но находящихся
при разных условиях содержания, либо на разных этапах иммуногеиеза, течения
болезни и т.д. Постановку и проведение опыта, а также учет результатов
осуществляют так же, как и при отработке дозы ld5o. Напряженность иммунитета
определяют с учетом процента погибших рыб в опытной группе в сравнении с
контролем.
По окончании аквариумных опытов проводят обеззараживание воды в
аквариумах путем создания в них 10%-ной концентрации формалина или 10%-
ного раствора хлорной извести. Через час воду спускают в канализационную сеть,
а рыб сжигают. Весь инвентарь и посуду, бывшие в употреблении при работе с
больной рыбой, дезинфицируют в 10%-ном растворе формалина в течение часа.
При завершении биологической пробы в бетонированных бассейнах,
земляных садках, карантинных прудах рыбу сжигают и проводят дезинфекцию
воды пугем хлорирования, доводя содержание свободного хлора в воде до 4-5
мг/л. Сутки спустя воду пропускают через известковый фильтр (используют
только свежую негашеную известь). После этого проводят дезинфекцию ложа
прудов или садков и бассейнов негашеной или хлорной известью и оставляют их
без воды на срок не менее месяца. С утверждением настоящих Методических указаний утрачивают силу Методические указания по определению уровней естественной резистентности организма рыб (к инфекционным болезням)", утвержденные ГУВ Госагропрома СССР 13.07.87 №432-3.
Приложение 1
к Методическим указаниям по определению уровня
естественной резистентности и оценке
иммунного статуса рыб, утв. 25 ноября 1999 г.
Уровень фагоцитарной активности лейкоцитов карпа на стадии
поглощения, %
| Возраст рыб, время фагоцитоза с момен- та термостатирова-ния или введения Объекта фагоцитоза | Низкий | Средний | Высокий | ||||
| Процент фагоцитоза | Фагоцитарный индекс | Процент фагоцитоза | Фагоцитарный индекс | Процент фагоцитоза | Фаго-цитар-ный индекс | ||
| сеголетки | 15 мин. | 6,0+2,0 | - | 8,0+2,0 | - | 10 и более | - |
| 30 мин. | 7,0+2,0 | 0,3+0,2 | 9,0+2,0 | 0,6+0,2 | 11-"- | 0,7 и более | |
| 1 час | 17,0+4,0 | 0,8±0,2 | 21,0+4,0 | 0,1+0,2 | 25 -"- | 1,2-"- | |
| 1,5 часа | 24,0+5,0 | 1,3+0,2 | 29,0+5,0 | 1,5+0,2 | 34 -"- | 1.7-"- | |
| 2 часа | 19,0+5,0 | 1,4+0,2 | 24,0+5,0 | 1,6+0,2 | 29 -"- | 1,8-"- | |
| двухлетки | 15 мин. | 9.0+3,0 | 12,0+3,0 | - | 15 -"- | - | |
| 30 мин. | 13,0+5,0 | 0,3+0,2 | 18,0+5,0 | 0,5+0,2 | 23 -"- | 0,7 -"- | |
| 1 час | 20,0+7,0 | 0.9+0,2 | 27,0+7,0 | 1,1+0,2 | 34 -"- | 1,3-"- | |
| 1,5 часа | 28,0+8,0 | 1,3+0,2 | 36,0+6,0 | 1,5+0,2 | 44.-"- | 1,7-"- | |
| 2 часа | 27.0+8,0 | 1,4+0,2 | 35,0+8,0 | 1,6+0,2 | 43 -"- | 1,8-"- | |
| трехлетки | 15 мин. | 9,0+3,0 | 12,0+3,0 | - | 15-"- | - | |
| 30 мин. | 14,0+5,0 | 0,4+0,2 | 19,0+5,0 | 0,6+0,2 | 24 -"- | 0,8 -"- | |
| 1 час | 24,0+6,0 | 1,0+0,2 | 30,0+6,0 | 1,2+0,2 | 36 -"- | 1,4-"- | |
| 1,5 часа | 30,0+s,0 | 1,2+0,4 | 38,0+8,0 | 1,6+0,4 | 46 -"- | 2,0 -"- | |
| 2 часа | 28.0+8.0 | 1,4+0,3 | 36,0+8,0 | 1,7+0,3 | 44 -"- | 2,0 -"- | |
| 4-8-летки | 1 5 мин. | 10,0+5,0 | 15,0+5,0 | - | 20 -".- | - | |
| 30 мин. | 15,0+5,0 | 0,4+0,2 | 20,0+5,0 | 0,6+0,2 | 25 -"- | 0,8 -"- | |
| 1 час | 22,0+8,0 | 1,2+0,2 | 32,0+8,0 | 1,2+0,2 | 40 -"- | 1,4-"- | |
| 1,5 часа | 30,0+9,0 | 1,2+0-4 | 39,0+9,0 | 1,6+0,4 | 48 -"- | 2,0 -"- | |
| 2 часа | 29,0+9,0 | 1,4+0,3 | 38,0+9,0 | 1,7+0,3 | 47 -"- | 2,0-"- | |
... на его течение профессиональные вредности и стрессовые ситуации. Все это необходимо учитывать при диагностике и лечении атопического дерматита у пациентов разных возрастных группК л и н и ч е с к и е ф о р м ы а т о п и ч е с к о г о д е р м а т и т а. Единой классификации форм атопического дерматита в литературе нет. Многие авторы, в зависимости от возраста больных выделяют несколько форм ...
... с агрессивным поведением иммунной системы. 21 Медицинская биотехнология, ее задачи и достижения. Биотехнология представляет собой область знаний, которая возникла и оформилась на стыке микробиологии, молекулярной биологии, генетической инженерии, химической технологии и ряда других наук. Рождение биотехнологии обусловлено потребностями общества в новых, более дешевых продуктах для ...
... и построенное на современных научных основах питание обеспечивает нормальное течение процессов роста и развития организма, сохранение здоровья и трудоспособности человека. 2. Особенности рационального питания различных групп населения Современные представления о количественных и качественных порциях пищевого рациона базируются на концепции сбалансированного питания, разработанной А.А. ...
... ревматизма обусловила значительное снижение заболеваемости — до 0Д8 на 1000 детского населения. В разработку проблемы детского ревматизма внесли большой вклад отечественные педиатры В. И. Молчанов, А. А. Кисель, М. А, Скворцов, А. Б. Воловик, В. П. Бисярина, А. В. Долгополова и др. Эпидемиология, Установлена связь между началом заболевания и перенесенной стрептококковой инфекцией, в основном в ...
0 комментариев