2.4 Моносахаридный анализ

 

1)  Фильтрат 1 и Фильтрат 2 обессоливаем на колонке Sepharose G250, элюент 10мМ пиридин и 10мМ уксусная кислота рН 4,5.

2)  Высушиваем при 600С до полного отсутствия воды.

3)  Добавляем 400 мл ТФУ (Трифторуксусная кислота), помещаем в сушильный шкаф на 1 час при температуре 1200С.

4)  Затем опять сушим при 600С

5)  Растворяем водой и определяем моносахаридный соcтав на Daionex (Данные моносахаридного состава смотри в таблице 1).

6)  Мы объединили наши пробирки в следующие фракции до целлюлазной обработки: фракция 1 5–10; фракция 2 11–16; фракция 3 17–23; фракция 4 24–26; фракция 5 27–35.

Фракции после целлюлазной обработки: фракция 1 6–10; фракция 2 11–16; фракция 3 17–19; фракция 4 20–24; фракция 5 25–26; фракция 6 27–31.

Рисунок 1 – Распределение прочносвязанных полисахаридов во фракциях после растворения целлюлозы до ферментативной обработки.

Рисунок 2 – Распределение прочносвязанных полисахаридов после растворения после ферментативной обработки


Таблица 1. Моносахаридный состав во фракциях

Рамноза Арабиноза Галактоза Глюкоза Ксилоза Галактуроновая кислота Глюкуроновая кислота
Фракция 1, после целлюлазы 49.290 33.680 68.173 7.624 5.855 254.246 1.166
Фракция 2, после целлюлазы 61.981 43.261 99.500 6.804 13.317 311.360 3.365
Фракция 3, после целлюлазы 25.478 17.145 79.425 6.605 31.317 161.033 10.089
Фракция 4, после целлюлазы 6.349 7.295 48.161 25.828 86.452 67.533 10.577
Фракция 5, после целлюлазы 4.020 14.716 40.078 40.401 210.336 3.171 5.546
Фракция 6, после целлюлазы 1.678 4.407 13.217 28.017 136.191 6.781 1.291
Фракция 1, до целлюлазы 0 0 0 0 0.535 358.507 0
Фракция 2, до целлюлазы 0.556 0.481 2.689 5.364 1.107 0.476 0
Фракция 3, до целлюлазы 12.596 15.664 39.576 12.444 0 21.317 1.393
Фракция 4, до целлюлазы 20.762 24.131 54.572 11.218 54.753 67.032 2.955
Фракция 5, до целлюлазы 82.195 151.536 325.976 131.493 0 426.007 19.982


Информация о работе «Прочносвязанные полисахариды в клеточных стенках ксиланового типа»
Раздел: Химия
Количество знаков с пробелами: 41704
Количество таблиц: 1
Количество изображений: 2

0 комментариев


Наверх