ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕМОГЛОБИНА

2.2.1 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕМОГЛОБИНА.

Принцип: гемоглобин окисляют в метгемоглобин окисляют железосинеродистым калием (красная кровяная соль); образующийся с ацетонциангидрином окрашенный циан-метгемоглобин определяют как колориметрический.

Реактив: Трансформирующий раствор: ацетонциангидрин – 0,5 мг.; калий железосинеродистый – 0,2 г.; натрия гидрокорбанат – 1 г.; дистиллированная вода до 1 л. Раствор желтого цвета, прозрачный.

Калибровочный раствор гемоглобин цианида.

Специальное оборудование: фотоэлектроколориметр (ФЭК-56М).

Ход определения: В пробирку к 5 мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл крови (разведение в 251 раз). Содержимое пробирки тщательно перемешивают и оставляют стоять 10 мин. Измеряют на ФЭКе при длине волны 500-560 нм (зелёный светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против холостой пробы (трансформирующий р-р.). Измеряют при тех же условиях в стандартный раствор.

Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору гемиглобинцианида, или по формуле:

, где

Еоп – экстинкция опытной пробы;

Ест – экстинкция стандартного раствора;

С – концентрация гемоглобинцианида в стандартном растворе, мг/%;

К – коэффициент разведения крови;

0,001 - коэффициент для пересчёта мг/100 мл. в г/100 мл

При использовании унифицированным гемоглобинцианидным методом нормальное содержание Нв у мужчин составляет от 132,0 – 164,0 г/л.. у женщин составляет от 115,0 – 145,0 г/л

2.2.2. Скорость оседания эритроцитов (унифицированный микрометод Панченкова).

Принцип: Смесь крови с цитратом при стоянии разделяется на два слоя (нижний - эритроциты, верхний – плазма). При этом СОЭ, т.е. величина столбика плазмы, бывает различной в зависимости от изменений физико – химических свойств крови.

Реактивы: 5% р-р трёхзамещённого цитрата натрия.

Специальное оборудование: Аппарат Панченкова, состоящий из штативов и капилляров. Пробирки и капилляры должны быть химически чистыми.

Ход определения: Перед использованием капилляра промыть цитратом натрия и заполнить им пробирку на ¼. Кровь набирают до метки "0". Устанавливают капилляр в штатив через час отмечают скорость оседания эритроцитов по высоте отстоявшегося слоя плазмы в мм.

ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА:

1. Фелик Ф., Бакстер Дж.Д., Бродус А.Е., Фромен Л.А. Эндокринология и

метаболизм: пер. с анг. - М.: Медицина, 1985, стр.7-212.

2. Балаболкин М.И. Сахарный диабет. - М.: Медицина, 1994, стр.7-37;

45-95.

3. Клиническая эндокринология: Руководство/под ред. Старковой Н.Т. -

М.: Медицина, 1991, стр.188-245.

4. Агеев А.К. Клеточный состав островков поджелудочной железы при ин-

сулинонезависимых формах сахарного диабета. - Клиническая медици-

на., 1984, т.62 № 8 стр. 93-98.

5. Алексеев Ю.П., Мирходжаев А.Х. Характер изменения секреции глю-

кагона у больных сахарным диабетом. - Проблема эндокринологии,

1978, т.24 № 4 стр.3-9.

6. Кило Ч., Уильямсон Дж., Ричмонд Д. Что такое диабет? Факты и реко-

мендации: пер. с англ. - М.: Мир, 1993, стр.18-20.

7. Потемкин В.В. Эндокринология: М.: Медицина, 1978, стр.202-287.

8. Кахновский И.М., Кузнецов Д.А., Давиденков Н.В. - Терапевтический

архив, 1980, № 9, стр.51-55.

9. Германюк Е.Л. Гликолизированные белки крови при сахарном диабете.

Клиническая медицина., 1982, т.60, № 10, стр.17-21.

10.Ситникова А.М. - Терапевтический архив, 1971, № 7, стр.119-123.

11.Баранов В.Г., Зарипова З.Х. Уровень липидов в крови у больных при

сочетании ожирения со скрытыми явлениями сахарного диабета. -

Проблемы эндокринодогии, 1979, т.25, № 3, стр.3-6.

12.Маркосян А.А. Физиология тромбоцитов. - Л., 1970, стр.158-210.

13.Гусейнов Ч.С. Физиология и патология тромбоцитов. - М., 1971,

стр.640-645.

14.Вильчинская М.Н. Показатели микроциркуляторного гемостаза у боль-

ных сахарным диабетом./Системы свертывания крови и фибринолиз.

Саратов, 1975, ч.2, стр.362-363.

15.Файтельсон В.И., Файтельсон Г.И. Особенности агрегационных

свойств тромбоцитов у больных сахарным диабетом молодого возраста/

Патология сердечно-сосудистой системы при нарушениях нейро-гормо-

нальной регуляции. Л., 1978, стр.25-30.

16.Тихонова Е.П., Гринченко Т.С., Ревченко Т.В. Значение реактивных

гипогликемий в развитии сосудистых катастроф у больных сахарным

диабетом пожилого и старческого возраста/Современные проблемы ге-

ронтологии и гериазетрии, Тбилиси, 1977, стр.418-419.

17.Афанасьева С.Н. - Тезисный доклад 2-го Всесоюзного съезда эндокри-

нологов.: Л., 1980, стр.22.

18.Данилова А.И., Дектерева О.С. - Проблемы эндокринологии, 1984, т.30,

№ 5, стр.29.

19.Козлов Ю.А., Тимофеева Е.Е., Зингер М.Г. - Бюлютень эксперементаль-

ной биологии и медицины., 1986, № 4, стр.407.

20.Зак К.П., Руденко А.Н. - Проблемы эндокринологии., 1982, т.25, № 4,

стр.71.

21.Козлов Ю.А., Коврова В.С. - Экспериментальная анкология, 1981, т.3,

№ 4, стр.7.

22.Мартынова М.И., Смирнов В.В., Мазурина Н.А. - Вопросы охраны ма-

теринства и детства., 1988, № 5, стр.49.

23.Кравец Е.Б., Землякова З.М. - Проблемы эндокринологии, 1984, т.30,

№ 5, стр.18.

24.Кудрякова С.В., Романовская Г.А., Славина Л.С. Взаимосвязь А - хо-

лестерина и триглецеридов в крови у больных сахарным диабетом с

ИБС и без нее, - Терапевтический архив, 1984, т.56, № 10, стр.98-101.

25.Марков И.Н. - Научные труды центра института усовершенствования

врачей, 1970, т.153, стр.145-160.

26.Цирлина Д.Л., Бугров Ю.С., Городецкая Г.С. - Хирургия, 1974, № 4,

стр.95-99.

27.Залевская А.Г., Бурина М.К., Благосклоная Я.В. - Проблемы эндокри-

нологии, 1981, № 4, стр.24-27.

28.Окороков А.Н., Селиванов Р.М., Немцов А.В. - Терапевтический архив,

1982, № 10, стр.27-30.

29.Всемирная организация здравоохранения: комитет экспертов ВОЗ по

сахарному диабету. Второй доклад. Серия технических докладов. -

М.: Медицина, 1985, стр.90-92.

30.Диагностика и лечение внутренних болезней: Руководство для врачей.

В 3-х томах./под редакцией Комалова Ф.И., т.2. Болезни органов дыха-

ния, почек, эндокринной системы/Балаболкин М.И., Гембицкий Е.В.,

Гоган Е.Е. и др.; под ред. Гембицкого Е.В. - М.: Медицина, 1991,

стр.468-469.

31.Васюкова Е.А., Гуляева А.С., Кацнельсон М.И. и др. НLA - антигены,

гормональный профиль, антитела к инсулину у больных ИЗСД с рети-

нопатией, - Клиническая медицина, 1981, № 11, стр.42-44.

32.Давиденкова Е.Ф., Либерман И.С. Генетика сахарного диабета. - М.:

Медицина, 1988, стр.159-160.

33.Мазовецкий А.Г., Великов В.К. Сахарный диабет. - М.: Медицина,

1987, стр.103.

34.Савина Л.В., Червинский И.П., Гусев А.В., Булевская Н.В. Ксеропроте-

инография сывороточной системы крови больных сахарным диабетом -

Проблемы эндокринологии, 1987, № 5, стр.16-18.

35.Талантов В.В. Болезнь - инъекция - болезнь (осложнения инъекционной

терапии). - Казань.: 1989, стр.78-80.

36.Баранов В.Г., Стройнова А.С. Сахарный диабет - Л.: Медицина, 1980,

стр.127-128.

37.Справочник по диетологии/под ред. Покровского А.А. и

Самсонова М.А. - М.: Медицина, 1981, стр.611.

38.Вахитова С.Х., Юсупов А.С. Безлекарственные методы лечения са-

хирного диабета. Уфа: Башк. кн. изд-во, 1988, стр.63-66.

39.Orci L.The microanatomy of the islets of Langerhans. - Metobalism, 1976,

p.25.

40.Gepts W. Seguentiul changes in the cytological composition of the pancrea-

tic islest in juvenici diabetes.- In: Diabetas. Proceedings of the IX cenyress

of the International Diabetes Federation/Ed. Basaj J.B. - Amsterdam,

Excerpta. Medica, 1977, p.299.

41.Kohner E.M. Diabetic retinopathy. - Clin. Endocrinol. Metab., 1977, p.6,345.

42.Zawalich W.S. Intermediary metabolism and insulin secretion from isolated

rat isles of Langerhans - Diabetes, 1979, p.28,252.

43.Malase W.I.,Hutton J.C.,Kawazu S.,Herchuels A.,Valverbe M.,Sener A.The  

stimulus sekretion coupling of glucose-incluced insulin release.XXXV.The

links between metabolic and cationic events-Diabetologia,1979,p16,331.

44.Porte D.Ir. Pupo A.A.Insulin responses to glucose ;cvidence for a two pool

system in men.-G. clin. Invest,1969,p48,2309.

45.Duckworth W .C.,Stents F.B.,Heinemann M.,Kitabchi A.E.Initial site of insu-

lin cleavage by insulin protease.-Proc. Natl. Acad. Sci. USA,1979,p.76,635.

46.Rabkin R., Simon N.,Steiner S.,Colwell J.A.Effect of renal disease on renal up

teke and excretion of insulin in men.-N.Engl. J.Med.,1970,p.282,182.

47.Cherrington A.D., Chiasson J.C., Lityenguist J.E., Iennings A.S., Keller U.,

Lacy W.W. The reol of insulin and glucagon in the regulation of basal gluco-

se production in the postabsorptive dog. - I. Clin. Invest., 1976, p.58,1407.

48.Gerich I.E., Raptis S., Rosenthal I. Somatostatin symposium. - Metabolism,

1978, p.27. (Supp1), 1.

49.Sacca L., Sherwin R., Felig P. Effect of seguential in fasion of glucagon and

epinephrine on glucose turnover in the dog. - Am. I. Physiol., 1978, p.235,

E 287.

50.Deibert D.C., DeFronzo R. Epinephrine - induced insulin sesistance in man. -

I. Clin. Invest., 1980, p.65,707.

51.Eigler N., Sacca L., Sheruin R.S. Synergistic interactions of physiologic incre-

ments of glucagon, epinephrine, and control in the dog. - A model for stress -

indused hyperglycemia. - I. Clin. Invest., 1979, p.63,114.

52.Sacca L., Sheruin R., Felig P. Influence of comatostatin on glucagon - and

epinephrine - stimulated hepatic glucose outsud in the dog. - An. I. Physiol.,

1979, p.238 E113.

53.Brodows R.I., Ensinck I.W., Campbell R.G. Mechanism of plasma cyclic

AMP response to hypoglicemia in man. - Metabolism, 1978, p.25,659.

54.Olefscy J.M. Effect of dexamethasone on insulin binding glucose transport

ang glucose oxidation of isolated rat adipocytes. - I. Clin. Invest., 1975, p.56,

1429.

55.Shervin R.S., Felig P. Glucagon physiology in health and dislase. - In: Inter-

national Review of physiology/Ed. McCann S.M. Vol.16 Endocrine physiolo-

gy. - Baltimor; University Park Press, 1977, p.151.

56.Serich G.E., Lerenri M., Schncider V. - New Engl. S. Med., 1975, vol.292,

p.985-988.

57.Wahren G., Felig P., Cerasi E., Luft R. Splancnnic and peripheral glucose

and amino acid metabolism in diabetes mellitus. - I. Clin. Invest., 1972, p.51,

1870.

58.Felig P., Wahren I. Influence of endogenous insulin secretion on splanennic

glucose and amino acid metabolism. - I. Clin. Invest., 1971, p.50,1702.

59.Felig P., Wahren I. Renal substrate ex change in human diabetes. - Diabetes,

1975, p.24, 730.

60.Chase P.H., Glasgow A.M. Iuvenile diabetes mellitus and serum lipids and

lipoprotein levels. - Am. I. Dis. Child., 1976, p.130,1113.

61.Brunzell I.D., Chait A., Bierman E.L. Pathophysiology of lipoprotein tran-

sport. - Metabolism, 1978, p.27.

62.Wahren J., Felig P., Hagenfeldt l.. Effect of protein ingestion on speanchnic

and leg metabolism in normal man and in diabetes mellitus. - I. Clin. Invest.,

1976, p.57,987.

63.Bunn H.F., Gabbay K.H., Gallop P.M. - Sciense, 1978, vol.200, p.21-22.

64.Kohner E.M., Meneschi F., Cassar I. et al. - Diabetologia (Berl.), 1980,

Bd.19, S.21.

65.Klujber L., Soltesz G., Gaszaiv V. et al., - Ibid., 1979, p.300.

66.Bolli I., Compagnuli P., Catechini M. et al - Diabetologia (Berl.), 1980, Bd.19,

S.259.

67.Herold K.C.,Huen T.,Golld H., Traisman H., Rubenstein A.H. - Diabetologia.,

1984, vol.27, supll.7, p.102.

68.Mahmoud A.A., Rodman H.M., Mandel M.A., Warren H.S. - I. Clin. Invest.

1976, vol.57, № 2, p.362.

69.Castelli W.P., Doyle I.T., Gordon T. - Circulation., 1975, vol.52, suppl.2,p.97.

70.Miller M.E., Backer L. - S. Pediat., 1972, vol.81, p.978-982.

71.Fajans S.S., Cloutier M.C., Crowther R.L. Clinical and etiologic heterogene-

ity of ediopathic diabetes mellitus. - Diabetic, 1978, № 27, p.1102.

72.Leslie R.D.G., Puke D.A. Genetic of diabetes. - The diabetes annual 3. - Eds

K.G.Alberti, L.P.Krall. - Elsever science publischers.- 1987, p.39-55.

73.Yoon I.W., Austin M., Onodera T., Notkins A.L. Virus - induced diabetic

ketoacidosis. - N. Engl. I. Med., 1979, p.300,1173.

74.Nerup I., Platz P., Ruder L.P., Thomsen H., Suejgaard A. HLA islet cell

antibodies and types of diabetes. - Diabetes, 1978, suppl.1, p.27,247.

75.Hammer M.R., John P.N., Flinn M.D. et al. Glicated fibrinogen: A new index

of shorttem diabetic control. - Ann. Din. Biohim, 1989, vol.26, № 1, p.58-62.

76.Lyons T.S., Kennedy L. Non-enzymatic glycosylution of skin collogen with

type 1 diabetes mellitus and limited joint mobility - Diabetologia, 1985, vol.28,

№ 1, p.2-5.

77.Oimomi M., Igaki N., Hata F. et al. Add - and diabetes accelerated glycotion

in the human aorta - Arch. Gerontol. Geriatr., 1989, vol.8, № 2, p.123-127.

78.Singer-Granick C., Hoffman R.P., Kerensky H. Glicagon us ponses to hypog-

lycemia in children and adolescents with ADDM - Diabetes care, 1988, vol.3,

p.234-238.

79.Schade D.S., Santiago I.V., Suyler I.S., Rizza R. Intensive insulin therapy -

N.Y.: Excerpta Medica, Prineeton. - 1983, p.207-209.

80.Baily S.I., Nattrass M. Treatment - metformin//Bailliere`s clin. Endocrin. Me-

tabol. - 1985, vol..2, p.455-476.