Изучение возможности проведения процесса обезжиривания I с применением ферментного препарата

Выделение, изучение свойств микроорганизмов и их использование для выполнения подготовительных процессов переработки овчинно-мехового сырья
Щелочные протеиназы рода Bacillus Получение щелочных протеиназ Субстратная специфичность микробных липаз Применение микробных липаз Методы исследования Методика изучения культуральных свойств Приготовление бактериальной суспензии Определение протеолитической активности (метод Вильштеттера и Вальдшмидт – Лейтца в модификации) Качественный анализ вещества по ИК-спектрам поглощения Определение токсичности сточных вод Изучение морфолого-физиологических и культуральных свойств микроорганизмов Влияние условий культивирования на свойства ферментного препарат а, продуцируемого культурой рода Listeria Изучение возможности проведения процесса обезжиривания I с применением ферментного препарата Экономическая часть Безопасность жизнедеятельности Требования к микробиологическим лабораториям Охрана окружающей среды. спав и их вовлечение в метаболические процессы
198182
знака
14
таблиц
0
изображений

3.3 Изучение возможности проведения процесса обезжиривания I с применением ферментного препарата


Целью данного этапа эксперимента было получение ферментных препаратов на средах, содержащих в качестве источника углерода СПАВ (Превоцелл W-OF-7 с рН<7, рН~7, рН>7 и Wetter HAC с рН<7) и шерстный жир, с последующим их применением для проведения процесса обезжиривания I меховой овчины.

В результате выполненных ранее экспериментов были разработаны оптимальные условия культивирования культур рода Listeria sp I' и 7 c целью получения комплексного ферментного препарата с заданными свойствами. Состав синтетических сред представлен в табл. 10.


Таблица 10. Состав синтетических сред


Расход химматериалов, г/дм3
Компоненты среда, содержащая

Превоцелл W-OF-7 Wetter HAC
NaH2PO4 1,0 1,0
NH4NO3 1,0 1,0
KCl 0,5 0,5
MgCl2 0,1 0,1
Превоцелл W-OF-7 0,5 -
Wetter HAC - 0,5
Шерстный жир 1,0 1,0

Среды культивировали в течение 72 ч при температуре (38±0,5)0С при переменном механическом воздействии на «Shaker Type» с частотой колебаний 250 об/мин и амплитуде 6.

В начале культивирования (0 ч) и через 72 часа (перед обезжириванием) снимали следующие показатели: рН, кислотность, мутность, концентрацию белка, КОЕ, липолитическую и протеолитическую активности, которые представлены в табл. 11.

Как видно из данных табл. 11, величина КОЕ во всех случаях возрастает, что подтверждается увеличением мутности (для Превоцелл W-OF-7 c рН=4,82 показатель мутности изменяется с 0,12 до 0,30). Увеличение КОЕ объясняется ростом числа микробных продуцентов за счет достаточного количества субстрата. Наблюдаемое уменьшение активной реакции среды и увеличением кислотности, вероятно, происходит за счет деструкции жировых веществ с образованием жирных кислот.


Таблица 11. Влияние вида СПАВ и активной реакции среды на свойства ферментного препарата, продуцированного культурами рода Listeria



Синтетическая среда, содержащая
Показатели Время культивирования, ч

Превоцелл

W-OF-7 (рН<7)

Превоцелл

W-OF-7 (рН=7)

Превоцелл

W-OF-7 (рН>7)

Wetter HAC (рН<7)
рН

0

72

4,82

4,75

7,10

6,90

8,70

8,40

4,95

4,90

Кислотность, г/дм3

0

72

0,21

0,24

0,36

0,42

-

-

0,24

0,30

Мутность, D2540

0

72

0,12

0,30

0,15

0,20

0,18

0,25

0,22

0,30

Lg КОЕ

0

72

3,25

3,43

2,95

3,76

3,15

4,02

3,12

3,98

Концентрация белка, г/дм3

0

72

0,45

0,86

0,62

0,84

0,15

0,36

0,68

0,92

Концентрация СПАВ, г/дм3

0

72

0,48

0,47

0,51

0,36

0,50

0,29

0,49

0,25

Липолитическая активность, ед/г

0

72

32,45

56,42

36,23

51,31

25,00

41,66

41,55

61,64

Протеолитическая активность, ед/г

0

72

10,22

11,15

9,56

10,38

12,09

12,98

8,85

9,38


Это связано с тем, что возрастает продуцирование ферментного препарата на промежутке времени 0–72 часа, так как данный промежуток времени соответствует логарифмической фазе развития прокариотических организмов. Возрастание липолитической и протеолитической активностей для всех составов связано с вовлечением СПАВ и жировых веществ в конструктивный и энергетический обмен.

Следующий этап эксперимента заключался в проведении обезжиривания с применением ферментных препаратов, полученных на жидких средах с Превоцелл W-OF-7 (при разных значениях рН) и с Wetter HAC (при рН<7). Овчину после процесса отмоки, проведенного по типовой методике отбирали методом асимметрической бахромы в соотвествии с п. 2.2.15. Обезжиривание проводили при жк=12, температуре (40±2)0С, продолжительности 45 мин и при непрерывном механическом воздействии на встряхивателе «Shaker Type-357» со скоростью 80 об/мин, амплитуде 7. В качестве контрольного варианта было проведено обезжиривание по типовой методике. Для проведения процесса обезжиривания с применением ферментного препарата, с каждым из исследуемых СПАВ с различными значениями активной реакции среды было приготовлено по 3 обезжиривающих ванны, содержащих культуральную жидкость, полученную после 72 ч инкубирования. Ванны под номерами 1,2,3 содержали ферментный препарат, продуцированный на среде, содержащей в качестве источника углерода шерстный и Превоцелл W-OF-7 с рН=4,75 с начальной концентрацией, разбавленный в 2 и 3 раза. Аналогично готовили ванны с Превоцелл W-OF-7 при рН=6,9 были обозначены номерами 4,5,6, при рН=8,40 – 7,8,9, а также с Wetter HAC (рН=4,90) 10,11,12. Ванну, приготовленную по типовой методике, обозначили номером 13.


Таблица 12. Состав обезжиривающих ванн


Тип обезжиривающей ванны
Состав Ферментный препарат, продуцированный

Превоцелл W-OF-7 (рН<7) Превоцелл W-OF-7 (рН=7)

Превоцелл

W-OF-7 (рН>7)

Wetter HAC (рН<7) Типовая методика

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Ферментный препарат, г/дм3

1,84



0,92


0,61


2,85


1,43


0,95


1,57


0,79


0,52


0,55


0,28


0,18


-

СПАВ, г/дм3 0,27 0,14 0,09 0,36 0,18 0,12 0,29 0,15 0,10 0,25 0,13 0,08 8,0
Формальде-гид, см3/дм3 - - - - - - - - - - - -

0,5

Карбонат натрия, г/дм3 - - - - - - - - - - - -

0,5


До и после обезжиривания определяли концентрацию СПАВ (п. 2.2.12), рН (п. 2.2.13), кислотность, мутность (п. 2.2.7), КОЕ (п. 2.2.2), а также содержание жира в волосяном покрове и кожевой ткани (п. 2.2.16), связь волоса с кожевой тканью (п. 2.2.17), белизну (п. 2.2.18).


Таблица 13. Влияние состава обезжиривающей ванны, содержащей ферментный препарат, на свойства полуфабриката

Тип ванны Содержание жировых веществ, % Прочность связи волоса с кожевой тканью, Н Белизна, %

в волосяном покрове в кожевой ткани

0* 15,22 22,64 19 65,5±3,9
1 3,32 17,26 26 79,7±2,5
2 4,12 17,88 45 70,9±4,9
3 5,65 18,24 50 74,9±3,4
4 3,05 17,15 25 79,5±2,6
5 3,91 17,34 40 79,4±5,8
6 4,49 18,02 50 74,2±2,9
7 2,89 15,36 36 76,6±6,1
8 3,32 15,89 42 71,5±2,5
9 3,98 16,17 54 70,8±2,2
10 2,58 13,26 12 81,0±3,0
11 3,16 13,73 23 78,4±2,5
12 3,72 14,25 32 80,1±3,6
13 ** 2,85 10,22 36 83,5±3,1
ГОСТ 4661–67 Не более 2,0 10–20 - -

Анализируя табл. 13 и рис. видно, что все ванны, в состав которых входил ферментный препарат, обладали обезжиривающим действием. До обезжиривания содержание жировых веществ в волосяном покрове составило 15,22%. После обезжиривания содержание остаточного жира в волосе находилось в пределах от 2,58% (для ванны, содержащей Wetter HAC без разбавления) до 5,65% (для ванны с Превоцелл W-OF-7 при рН<7 и разбавлении 1:3). По ГОСТу 4661–76 содержание жировых веществ в волосяном покрове должно составлять 1,5–2%. В связи с этим необходимо дополнительное обезжиривание для эффективного удаления жира.

В кожевой ткани содержание остаточного жира до обезжиривания составило 22,64%. После обезжиривания минимальное количество жира было характерно для состава с Wetter HAC при рН<7 и без разбавления (13,26%), а максимальное – для среды с Превоцелл W-OF-7 при рН<7 и разбавлении 1:2 (17,88%), по типовой методике – 10,22%. Все показатели содержания жировых веществ соответствует ГОСТ 4661–76 (10–20%). Со снижением концентрации ферментного препарата в обезжиривающей ванне, то есть при разбавлении в 2 и 3 раза, наблюдалось ухудшение обезжиривающей способности.

До обезжиривания прочность связи волоса с кожевой тканью составила 19 Н. После обезжиривания при снижении концентрации ферментного препарата и поверхностно-активного вещества, в обезжиривающих ваннах наблюдалось увеличение прочности связи. Так минимальное значение величины прочности было характерно для ванны с Wetter HAC при рН<7 и без разбавления и составило 12 Н, а максимальное значение – для ванны с Превоцелл W-OF-7 при рН>7 и разбавлении 1:3 (54 Н). Контрольной являлась величина, измеренная после процесса обезжиривания I по типовой методике, которая составила 36 Н. Увеличение прочности связи волоса и кожевой ткани в процессе обезжиривания, вероятно, объясняется развитием и метаболизмом микроорганизмов.

Для меховой овчины после обезжиривания была характерна достаточно высокая степень белизны волосяного покрова. Максимальная белизна составила для волоса по типовой методике (83,5±3,1%). Это объясняется высоким содержанием концентрации СПАВ – 8 г/л в обезжиривающей ванне. При обезжиривании в составе, содержащем ферментный и Wetter HAC без разбавления, значение белизны составило 81,0±3,021%. Минимальная степень белизны характерна для составов с Превоцелл W-OF-7 при рН<7 и разбавлении 1:2 (70,9±4,9%) и разбавлении 1:2 (70,9±2,2%).

Таким образом, было установлено, что применение ферментного препарата с концентрацией 2–3 г./см3 при расходе СПАВ 0,4–0,5 г/дм3 обеспечивало оптимальное удаление жировых веществ с поверхности кожевой ткани. Но применение данного метода не обеспечивало достаточного удаления жировых веществ с волосяного покрова за один прием, поэтому для полного обезжиривания необходимо дополнительное проведение данного процесса.

После процесса обезжиривания определяли некоторые показатели сточных вод (табл. 14). рН обезжиривающих сточных вод находился в пределах 4,8–7,8, что соответствует ПДК для рыбохозяйственных водоемов (не более 4,5–8,5). Снижение величины рН наблюдалось с уменьшением концентрации ферментного препарата в рабочес растворе. После обезжиривания по типовой методике наблюдалась резко щелочная реакция (рН=9,5–10,0). В процессе обезжиривания увеличивается количество микроорганизмов, то есть lg КОЕ, но с разбавлением оно уменьшается. Так, для Превоцелл W-OF-7 при рН<7 без разбавления lg КОЕ =4,85; с разбавлением 1:2 lg КОЕ=3,64, а при разбавлении 1:3 lg КОЕ=3,02. В связи с этим увеличивается мутность. Максимальное значение мутности наблюдалось для ванны с Wetter HAC (рН<7) и составила D=6,0.

Также в процессе обезжиривания наблюдается уменьшение концентрации СПАВ. Максимальная остаточная концентрация СПАВ – 4,63 г./дм3 была характерна для процесса обезжиривания по типовой методике, что превышает нормы ПДК (0,1 г/дм3) в 46 раз. Это объясняется высокой начальной концентрацией – 8 г/дм3. Остаточная концентрация СПАВ после обезжиривания с Превоцелл W-OF-7 (рН<7) во всех 3-х ваннах немного превышает нормы ПДК и составила 0,15; 0,123; 0,105 г./дм3. Остальные составы соответствуют нормам ПДК.

Для оценки уровня токсического загрязнения (УТЗ) было проведено исследование токсичности вод после ферментативного обезжиривания I и обезжиривания по типовой методике. В качестве тест-объекта использовали рачков Daphnia magna Straus. Результаты оценки приведены в табл. 15.

Как видно из табл. 15, все сточные воды, включая стоки по типовой методике относились к 3 и 4 классу опасности, т.е. b-М-Т (токсичные) и a-М-Т (малотоксичные). Исключением являлись сточные воды, содержащие в своем составе Превоцелл W-OF-7 при рН=7 и разбавлении 1:3, при объеме вод 0,1 см3, которая относилась к олиготоксичным, т.е. условно нетоксичным (100% выживаемость организмов).

Таким образом, качество меховых овчин после обезжиривания с ферментными препаратами и минимальной концентрацией СПАВ максимально приближается к качеству овчин, обезжиренных по типовой методике. В результате оценки некоторых показателей сточных вод после процесса обезжиривания I видно, что технология, основанная на применении ферментного препарата, продуцируемого культурой рода Listeria sp при минимальном расходе СПАВ позволяет несколько улучшить параметры сточных вод. Из проведенных исследований УТЗ следует, что токсичность сточных вод при проведении обезжиривания с ферментным препаратом и по типовой методике одинакова, за исключением состава Превоцелл W-OF-7 при рН=7 и разбавлении 1:3, токсичноcть которого составила О-Т (олиготоксичные).


Таблица 15. Оценка УТЗ на дафниях

Тип ван-ны Объем сточ-ной воды, см3 Выживаемость Daphnia magna, % УТЗ


1 ч 2 ч 3 ч 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч
1

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

60

80

80

40

60

80

40

60

80

b-М-Т

b-М-Т

b-М-Т

2

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

60

80

100

20

60

80

20

60

80

a-М-Т

b-М-Т

b-М-Т

3

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

40

60

80

20

40

60

0

20

60

a-М-Т

a-М-Т

b-М-Т

4

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

60

60

60

40

60

60

20

40

40

a-М-Т

b-М-Т

b-М-Т

5

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

60

100

100

40

80

60

0

80

60

a-М-Т

b-М-Т

b-М-Т

6

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

40

60

100

20

40

100

0

20

100

a-М-Т

a-М-Т

О-Т


7

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

60

60

80

20

20

40

0

0

20

0

0

0

0

0

0

a-М-Т

a-М-Т

a-М-Т

8

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

80

80

100

60

60

80

20

40

80

0

40

80

0

20

60

a-М-Т

a-М-Т

b-М-Т

9

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

60

60

100

40

40

60

20

20

60

0

0

0

0

0

0

a-М-Т

a-М-Т

a-М-Т

10

1,0

0,5

0,1

80

100

100

80

100

100

80

100

100

60

60

80

0

20

20

0

0

20

0

0

0

a-М-Т

a-М-Т

a-М-Т

11

1,0

0,5

0,1

60

100

100

60

100

100

60

100

100

40

60

60

0

20

20

0

0

0

0

0

0

a-М-Т

a-М-Т

a-М-Т

12

1,0

0,5

0,1

100

100

100

100

100

100

100

100

100

40

60

100

0

20

60

0

20

40

0

20

40

a-М-Т

a-М-Т

b-М-Т

13

1,0

0,5

0,1

100

100

100

80

100

100

80

100

100

80

100

100

40

100

100

0

20

60

0

0

40

a-М-Т

a-М-Т

b-М-Т



Информация о работе «Выделение, изучение свойств микроорганизмов и их использование для выполнения подготовительных процессов переработки овчинно-мехового сырья»
Раздел: Биология
Количество знаков с пробелами: 198182
Количество таблиц: 14
Количество изображений: 0

Похожие работы

Скачать
137608
27
11

... продукции, а значит, дает значительный экономический эффект. 2. Объекты и методы исследования Целью дипломной работы являлось изучение свойств бактериальной суспензии, с последующим применением в подготовительных процессах переработки мехового сырья. Для выполнения эксперимента был составлен сетевой график, представленный на рисунке 1.  Применение ферментов в кожевенной и ...

Скачать
192250
22
14

... Охрана окружающей среды   Заключение   Рисунок 2 – Сетевой график дипломной работы   2.1 Объекты исследования   Объектом исследования в дипломной работе являлись микроорганизмы, выделенные из различных природных жиров: нерпичьего (Н), нерпичьего, выращенного на среде с шёрстным жиром (Нв), шерстного (В) и микроорганизмы, выделенные из ...

0 комментариев


Наверх